詳細介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
英文名稱:FMK 9a 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 FMK9a是autophagin-1的抑制劑,在FRET和LRA試驗中測定的IC50值分別為80和73nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1955550-51-2 純度:95.0% 分子量:392.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
球孢傘菌霉Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii
低平101Lactobacillus bifermentans
銅綠假單胞菌Lactobacillus helveticus
黑曲霉Lactobacillus acidophilus
側茁霉屬Lactobacillus coryniformis subsp. coryniformis
金針菇Lactobacillus fermentum
豬丹絲菌Lactobacillus salivarius
豬丹絲菌Corynebacterium glutamicum
馬杜拉放線菌Corynebacterium flavescens
灰平鏈霉菌Bacillus sp.
桔青霉Bacillus sp.
大腸埃希菌Bacillus aquimaris
李季倫氏類芽孢桿菌Bacillus sp.
果生鏈核盤菌Bacillus firmus
法氏檸檬桿菌Bacillus sp.
豇豆慢生根瘤菌Bacillus hwajinpoensis
豬肺炎支原體抗體(MP-Ab)免疫試劑盒髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體人轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒大豆皂苷Aa
豬肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)免疫試劑盒腺苷環(huán)化1抗體人轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒大豆皂苷Ab
豬肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)免疫試劑盒腺瘤樣息肉抗體人轉化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒大豆皂苷Ac
豬肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)免疫試劑盒溶血磷脂?;D移抗體人轉化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒大豆皂苷Ba
autophagin-1抑制劑(FMK 9a)D-脯甲酯鹽鹽
其他右旋脯甲酯氫氯化物;D-脯甲酯氫氯化物
英文名稱:D-Proline methyl ester hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:1克/5克/25克
CAS號:65365-28-8
C6H11NO2•HCl=165.62
級別:BR
含量:≥98.0%
比旋光度:33.0±2°(c=1 in H2O)
性狀:至類細粉末晶體
用途:生化研究。
保存:2~8℃