培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Polo-like kinase1抑制劑 | GSK461364 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
商品介紹:
GSK461364是一種有效的Polo-like kinase1抑制劑,Ki值為2.2nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):929095-18-1 別名:GSK461364A 純度:99.74% 分子量:543.6 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小葉相思根瘤菌磷化絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗體Human MINK1 ELISA Kit免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒
束型青霉磷化絲裂原活化蛋白激MKK6抗體Human MIPEP ELISA Kit免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA試劑盒
天津李時(shí)珍氏菌嗜粒趨化蛋白22抗體Human MIPOL1 ELISA Kit免疫球蛋白輕鏈kappa(κ-IgLC)ELISA試劑盒
金格桿菌甲硫腦啡肽抗體Human MKL1(MKL/myocardin-like protein 1) ELISA Kit免疫球蛋白結(jié)合蛋白(BIP)ELISA試劑盒
橄欖色硬膜鏈霉菌抗體Human MITD1 ELISA Kit免疫球蛋白γ-1鏈C區(qū)(IGHGI)ELISA試劑盒
粉樹孢基質(zhì)金屬蛋白9抗體Human Mitofilin ELISA Kit免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒
Sphingomonas panni 原癌基因M-ras抗體Human F12(Coagulation factor XII) ELISA Kit免疫球蛋白j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒
魯氏接合酵母單核趨化蛋白1抗體Human MKNK2 ELISA Kit免疫球蛋白G4(IgG4)ELISA試劑盒
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)抗體Human MFN1 ELISA Kit免疫球蛋白G3(IgG3)ELISA試劑盒
漢遜德巴利酵母雞支原體抗體Human METT10D ELISA Kit免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA試劑盒
蘇云金芽胞桿菌熊本亞種線粒體轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human MED4 ELISA Kit免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
荔枝有絲分裂抑制缺陷蛋白1抗體Human MED6 ELISA Kit免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)ELISA試劑盒
東方伊薩酵母膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體Human MEF2A ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒
色串孢屬粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Human MED8 ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒
棲果盤孢粘膜血管定居因子抗體Human MEIS3 ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒
停滯棒桿菌抑癌基因抗體Human MUC5B(Mucin-5B) ELISA Kit免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
粗皮側(cè)耳(平菇)Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR鹽小檗堿
基桿菌Phenylobacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品鹽青藤堿
幽門螺桿菌Helicobacter│pylori 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR巖白菜
Polo-like kinase1抑制劑聚醚
其他 月桂聚醚-9
英文名稱: C12E9
其他英文名稱: Nonaethylene glycol monododecyl ether;Dodecyl nonaethylene glycol ether;Dodecylnonaglycol;Polidocanol;Polyoxyethylene (9) lauryl
產(chǎn)品規(guī)格: 超純
包 裝: 1克/50克
CAS號(hào):3055-99-0
C30H62O10=582.81
級(jí)別:Ultra pure grade
Oxidant:Fee
性狀:無色或淡黃色透明液體。Supplied in a 10%(w/v) solution
用途:生化研究。
保存:2~8℃