詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
LDC000067 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
LDC000067是高度選擇性的CDK9抑制劑,體外實(shí)驗(yàn)的IC50值為44±10nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1073485-20-7 別名:LDC067 純度:98.14% 分子量:370.43 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
乳鏈球菌腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白3相互作用蛋白1抗體Anti-HSPA9 Antibody脫氧鳥苷激(DGUOK)ELISA試劑盒
熱帶假絲酵母四連接TN抗體Anti-HSPB1 Antibody脫氧核糖核Ⅹ(DNASEⅩ)ELISA試劑盒
厚垣鐮孢菌Toll樣受體1抗體Anti-HSPA9 Antibody脫氧核糖核Ⅱ(DNASEⅡ)ELISA試劑盒
鼠李糖乳桿菌DNA拓普西異構(gòu)ⅡA抗體Anti-HSPB2 Antibody脫氧核糖核Ⅰ樣2(DNASE1L2)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌三葉肽因子2抗體Anti-HSPB1 Antibody(PB0218)脫氧核糖核Ⅰ(DNASE1)ELISA試劑盒
米曲霉端粒結(jié)合蛋白2抗體Anti-HSPB8 Antibody脫氧輔蛋白羥化/單加氧(DOHH)ELISA試劑盒
多主葡萄殼菌形成相關(guān)凋亡蛋白7抗體Anti-HSPB2 Antibody脫氧輔蛋白合(DHPS)ELISA試劑盒
鞘單胞菌端粒相關(guān)蛋白1抗體Anti-HSPB8 Antibody脫氧吡啶酚(DPD)ELISA試劑盒
康寧木霉谷酰轉(zhuǎn)3抗體Anti-HSPB6 Antibody脫氧胞苷激(DCK)ELISA試劑盒
構(gòu)巢曲霉環(huán)指蛋白92抗體Anti-HSPD1 Antibody脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(apoTf)ELISA試劑盒
米根霉環(huán)指蛋白調(diào)節(jié)蛋白激C蛋白抗體Anti-HSPE1 Antibody褪黑受體1B(MTNR1B)ELISA試劑盒
沉積物鹽坑微菌TRIM50蛋白抗體Anti-HSPBAP1 Antibody褪黑受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒
紫麥角菌環(huán)指蛋白88抗體Anti-HSPG2 Antibody突觸足蛋白(SYNPO)ELISA試劑盒
大豆慢生根瘤菌鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體Anti-HSPD1 Antibody(PB0301)突觸(SYP)ELISA試劑盒
食物芽孢桿菌環(huán)指蛋白98抗體Anti-HSPH1 Antibody突觸伸蛋白2(SYNJ2)ELISA試劑盒
大腸埃希菌環(huán)指蛋白16抗體Anti-HSPG2 Antibody(PB0302)突觸伸蛋白1(SYNJ1)ELISA試劑盒
RhoGTP激活蛋白13抗體檸檬桿菌屬人牙周膜成纖維細(xì)胞
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體靈芝人前脂肪細(xì)胞
轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM1抗體糙皮側(cè)耳小鼠成骨細(xì)胞
核轉(zhuǎn)錄因子SOX14抗體膠韌革菌(榆耳,榆蘑)小鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞
CDK9抑制劑(LDC000067)核糖核T1
英文名稱:Ribonulease T1 from Aspergillus oryzae
其他英文名稱:Rnase T1
產(chǎn)品規(guī)格:BR,1000u/ul
包裝:100KU/500KU
CAS號(hào):9026-12-4
級(jí)別:BR
分子量:11.2kDa,單體
來源:大腸桿菌細(xì)胞含有米曲霉(Aspergillus oryzae)來源的克基因rntA
濃度:1000U/ul
活力定義:1個(gè)活性單位是指37℃,pH7.5條件下,酵母RNA溶解水解15分鐘使其260nm波長(zhǎng)吸光值增加1.0所需的量
活性分析混合物:50mM Tris-HCL(PH7.5), 2mM EDTA, 3mg/ml酵母RNA
用途:生化研究。
保存:-20℃