詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PFI-1 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
PFI-1是一種有效的BET抑制劑,能夠有效抑制BRD4,IC50值為0.22μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1403764-72-6 純度:99.87% 分子量:347.39 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
葡萄汁酵母Pseudomonas syringae大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒
黑曲霉Pseudomonas syringae大鼠水通道蛋白2(AQP-2) ELISA試劑盒
李克犁頭霉(傘枝梨頭霉)Pseudomonas syringae大鼠水通道蛋白2(AQP-2) ELISA試劑盒
臭曲霉Pseudomonas syringae大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒
硫磺絢孔菌Pseudomonas syringae大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒
中慢生華癸根瘤菌Pseudomonas syringae大鼠抑制A(INH-A)ELISA試劑盒
Dokdonella fugitivaPseudomonas syringae大鼠抑制A(INH-A)ELISA試劑盒
PseudotripoconidiumPseudomonas syringae大鼠絨毛膜促性腺激β(β-CG)ELISA試劑盒
小孢曲霉Pseudomonas taetrolens大鼠絨毛膜促性腺激β(β-CG)ELISA試劑盒
耐堿成對(duì)桿菌Pseudomonas tolaasii大鼠性激結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒
圍小叢殼Pseudomonas tolaasii大鼠性激結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒
Pseudomonas tolaasii大鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒
球毛殼Pseudomonas tolaasii大鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒
球孢白僵菌Pseudomonas tolaasii大鼠脫氫表雄(DHEA)ELISA試劑盒
葡萄座腔菌Pseudomonas tremae大鼠脫氫表雄(DHEA)ELISA試劑盒
鈉線菌屬Pseudomonas veronii大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒
核突觸蛋白α+β抗體大斗菇(大革耳)鈣(Ca)比色法測(cè)試盒
絲裂原活化蛋白激磷p38γ抗體多脂鱗傘(黃傘)總鐵結(jié)合力(TIBC)比色法測(cè)試盒
L選擇抗體柱狀田頭菇(茶樹菇、楊樹菇)脂質(zhì)代謝 脂質(zhì)代謝 脂質(zhì)代謝 脂質(zhì)代謝 脂質(zhì)代謝
鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug+SNAIL抗體大杯傘游離脂肪(NEFA)比色法測(cè)試盒
BET抑制劑(PFI-1)S-羧甲基-L-半胱
其他羧甲司坦;S-羧甲基半胱
英文名稱:S-Carboxymethyl-L-Cysteine
其他英文名稱:3-Carboxymethylthio-L-alanine;Carbocysteine
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:5克/25克/100克
CAS號(hào):638-23-3
C5H9NO4S=179.19
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:-33.5°~-36.5°
PH:2.0~3.5
氯化物:≤0.04%
銨鹽:≤0.02%
重金屬:≤10ppm
鐵鹽:≤10ppm
砷鹽:≤1ppm
硫鹽:≤0.02%
干燥失重:≤0.30%
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.10%
性狀:的晶體或結(jié)晶粉末,無臭,略味道。本品在熱水中略溶,在水中極微溶解,在乙,冰醋和中不溶,在或堿溶液中易溶
用途:生化研究
保存:RT