培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Wogonin是一種天然黃酮類物質(zhì),能夠抑制CDK8andWnt的活性,具有抗炎、抗腫瘤等功效。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):632-85-9 純度:99.82% 分子量:284.26 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大腸埃希氏菌兔子堿性成纖維生長(zhǎng)因子Anti-LDLRAD3 Antibody人型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA試劑盒
Marella suaedae人結(jié)締組織活化肽ⅢAnti-LGALS2 Antibody人型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA試劑盒
玫瑰小雙孢菌大鼠白介7Anti-LEF1 Antibody人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
釀酒酵母人巨噬集落激因子受體Anti-LEFTY1 Antibody人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
金黃回旋鏈霉菌兔子前列腺E2Anti-LFNG Antibody人促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)ELISA試劑盒
熱紫鏈霉菌不滲透亞種魚促卵泡Anti-LFNG Antibody人促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)ELISA試劑盒
核桃殼囊孢菌小鼠β-防御Anti-LGALS7 Antibody人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)ELISA試劑盒
多形布勒擔(dān)子酵母凋亡原位elisa試劑盒(我公司提供代測(cè)服務(wù))Anti-LGALS8 Antibody人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)ELISA試劑盒
香菇(L988)大鼠絲/蘇蛋白磷Anti-LGALS9 Antibody人蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒
地衣芽孢桿菌魚促黃體激Anti-LHCGR Antibody人蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒
盤長(zhǎng)孢狀盤孢小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Anti-LIG3 Antibody人睪受體(TR)ELISA試劑盒
蠟蚧菌人免疫球蛋白A Fc段受體ⅠAnti-LILRA1 Antibody人睪受體(TR)ELISA試劑盒
IBV M41 HAR/HI serum 陽(yáng)性血清(荷蘭引進(jìn))兔子5羥色Anti-LIG4 Antibody人蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒
間型串珠鐮孢兔子β內(nèi)啡肽Anti-LILRA2 Antibody人蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒
昆明鏈霉菌小鼠神經(jīng)絲蛋白Anti-LILRA4 Antibody人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒
蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種魚磷化腺苷活化蛋白激Anti-LILRA5 Antibody人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒
視黃醛結(jié)合蛋白1抗體克魯斯假絲酵母小鼠肺腺癌細(xì)胞系
環(huán)指蛋白5抗體E3泛蛋白連接RNF5綠色鏈霉菌人肺癌細(xì)胞
核糖體蛋白L15抗體地生翅孢殼昆蟲細(xì)胞
核糖體蛋白L19抗體奇異翅孢殼鼠黑色瘤細(xì)胞
CDK8andWnt抑制劑(Wogonin)碘化銅
其他 碘化亞銅;碘化亞銅(I);碘化銅(Ⅰ);一碘化銅
英文名稱: Cuprous iodide
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99.5%
包裝:100克/250克
CAS號(hào):7681-65-4
CuI=190.45
級(jí)別:AR
含量:≥99.5%
鹽不溶物:≤0.01%
硫鹽:≤0.01%
堿金屬及堿士金屬:≤0.1%
鐵:≤0.003%
性狀:稠密粉末或立方結(jié)晶。感光性差于溴化亞銅和氯化亞銅,在強(qiáng)光的作用下分解而析出碘。遇濃硫和硝分解。溶于水、氰化堿、硫代硫堿和碘化堿溶液,幾乎不溶于稀和乙,極不溶于水。相對(duì)密度(d254 )5.63。熔點(diǎn)588~606℃。沸點(diǎn)約1290℃。有刺激性。
用途:生化研究。有機(jī)反應(yīng)催化劑。飼料。劑。
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