培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
mTOR抑制劑(Rapamycin) | Rapamycin | 10mg|25mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:Rapamycin 產(chǎn)品規(guī)格:10mg|25mg|50mg|100mg|200mg|500mg Rapamycin是一種特異性的mTOR抑制劑,IC50為0.1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:53123-88-9 別名:Sirolimus 純度:98.98% 分子量:914.17 Rapamycin結(jié)構(gòu)式 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
抗生鏈霉菌間粘附分子1抗體Human ERp19 ELISA Kit兔子促卵泡(FSH)免疫試劑盒
燕麥鐮孢CD105抗體Human ESAM(Endothelial cell-selective adhesion molecule) ELISA Kit兔子促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
木賊鐮孢軸突蛋白5抗體Human ESCO2 ELISA Kit兔子雌二(E2)免疫試劑盒
空氣藤氏酵母轉(zhuǎn)錄因子COUP1抗體Human ESD ELISA Kit兔子腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒
玫瑰黃鏈霉菌表皮生長因子樣蛋白1抗體Human ESF1 ELISA Kit兔子層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒
運(yùn)動節(jié)桿菌癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體Human ESPN ELISA Kit兔子不對稱二甲基精(ADMA)免疫試劑盒
靈芝19號染色體開放閱讀框75抗體Human ERGIC3 ELISA Kit兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)免疫試劑盒
厭鹽假諾卡氏菌隱花色蛋白1抗體Human ERH ELISA Kit兔子補(bǔ)體蛋白5(C5)免疫試劑盒
大腸埃希菌隱花色蛋白2抗體Human ERI1 ELISA Kit兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
異常畢赤酵母鈣通道L型α2多肽抗體Human ERLIN2 ELISA Kit兔子表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌松球亞種L型電壓依賴型鈣通道β3(L-type Ca++ CPβ3)抗體Human Erlin-1(ERLIN1) ELISA Kit兔子白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌L型電壓依賴型鈣通道β4抗體Human ERMAP ELISA Kit兔子白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒
聚生殼菌電壓依賴性鈣通道CACNA1G+CACNA1H抗體Human ERMP1 ELISA Kit兔子白介9(IL-9)免疫試劑盒
迪吉氏黃桿菌鈣結(jié)合蛋白1抗體Human ERCC6 ELISA Kit兔子白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
中國臺灣芽孢桿菌神經(jīng)型一氧化氮合成結(jié)合蛋白抗體Human ERCC6L ELISA Kit兔子白介6(IL-6)免疫試劑盒
病研所芽孢桿菌蕈堿型乙酰膽堿受體M4抗體Human ERG ELISA Kit兔子白介4(IL-4)免疫試劑盒
沼澤考克氏菌Kocuria│palustris 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTAR DNA結(jié)合蛋白43試劑盒麥芽糖
爪哇根霉Rhizopus│javanicus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激級s腺苷同型半胱試劑盒3-O-沒食子酰粘
核盤菌Sclerotinia│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSyndecan-3/試劑盒木犀草-5-O-葡萄糖苷
mTOR抑制劑(Rapamycin)葡聚糖凝膠G-50
其他交聯(lián)葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)右旋糖酐凝膠G-50
英文名稱:Sephadex G-50
其他英文名稱:Cross-inked dextran gel G-50
產(chǎn)品規(guī)格:國產(chǎn)
包裝:25克/100克
CAS號:9048-71-9
干顆粒直徑:40~120um
分子量分級范圍:A.肽及球形蛋白質(zhì):1500~30000;B. 葡聚糖(線性分子):500~10000
床體積毫升/克干分子篩:9~11ml/g
PH:2~13
性狀:珠?;蚍勰瑢儆H水性凝膠。性穩(wěn)定,不溶于水、弱和堿溶液,遇強(qiáng)能使糖苷鍵分解
用途:生化研究。主要用于凝膠過濾,肽類分離、脫鹽,分子量測定。選擇G50時(shí)要考慮被分離物質(zhì)的分子量大小,應(yīng)該在其分離范圍
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