培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
HhAntag是GLI1介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄抑制劑,具有抗腫瘤活性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):496794-70-8 純度:99.33% 分子量:450.92 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
膠孢Pseudozyma rugulosa
墻壁圣格奧爾根菌Pseudozyma rugulosa
淺紫灰鏈霉菌褐色變種Pseudozyma rugulosa
松口蘑Rhodotorula glutinis
假單胞菌Candida tropicalis
苜蓿中華根瘤菌Pseudozyma shanxiensis
枯草芽孢桿菌Pseudozyma hubeiensis
裂褶菌Cryptococcus flavus
大腸埃希菌Metschnikowia pulcherrima
短波單胞菌Saccharomyces arboricolus
蘇云金芽孢桿菌鲇澤亞種Saccharomyces arboricolus
假黃色單胞菌Saccharomyces arboricolus
枯草芽孢桿菌枯草亞種Rhodotorula sp.
潔小菇Cryptococcus sp.
尖角凸臍蠕孢Pichia sp.
E.coli C600Cryptococcus sp.
小鼠白活化黏附因子(ALCAM)免疫試劑盒螺旋一環(huán)一螺旋蛋白5抗體人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒人參皂苷Rg6
小鼠白三烯E4(LTE4)免疫試劑盒二磷3核苷抗體人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒人參皂苷Rh1
小鼠白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒腦蛋白絲/蘇激29抗體人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒(S型)人參皂苷Rh2
小鼠白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒智力發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白BRWD3抗體人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒人參皂苷Rh3
GLI1介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄抑制劑(HhAntag)6-巰基嘌呤一水合物
其他6-硫代嘌呤;巰嘌呤;樂(lè)疾寧;6-巰嘌呤;6-巰基單酯;嘌呤-6-硫
英文名稱:6-MP
其他英文名稱:6-Purinethiol;6-Thiohypoxanthine;6-Mercaptopurine monohydrate
產(chǎn)品規(guī)格:特純,99%
包 裝: 1克/5克/25克
CAS號(hào):6112-76-1
C5H4N4S•H2O=170.19
級(jí)別:Puriss
含量:≥99.0%
熔點(diǎn):313℃
用途:生化研究
保存:2~8°C