詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Ac-DEVD-CHO | 100μl | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:Ac-DEVD-CHO 產(chǎn)品規(guī)格:100μl 分子量:502.5 儲存:-20℃,有效期12個月。 純度:≥98%(HPLC) 濃度:10mM in DMSO |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>50%,BSSpondin-2 elisa試劑盒毛萼結(jié)
百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白2試劑盒莫諾宗
郎伍德鏈霉菌Streptomyces│longwoodensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白1試劑盒貓眼草黃
Caspase 3抑制劑Ac-DEVD-CHO(10mM)葡聚糖凝膠G-100
其他交聯(lián)葡聚糖凝膠G-100;交聯(lián)右旋糖酐凝膠G-100
英文名稱:Sephadex G-100
其他英文名稱:Cross-inked dextran gel G-100
產(chǎn)品規(guī)格:國產(chǎn)
包裝:25克/100克
CAS號:9050-94-6
干顆粒直徑:40~120um
分子量分級范圍:A.肽及球形蛋白質(zhì):4000~150000;B. 葡聚糖(線性分子):1000~100000
床體積毫升/克干分子篩:10~15ml/g
PH:2~13
性狀:珠?;蚍勰?,屬親水性凝膠。性穩(wěn)定,不溶于水、弱和堿溶液,遇強能使糖苷鍵分解
用途:生化研究。用于凝膠過濾,肽類分離、脫鹽,分子量測定
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