中文名稱:細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit 產(chǎn)品規(guī)格:100T 形態(tài)學(xué)檢測(cè)是研究細(xì)胞凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的,起初,細(xì)胞間連接和微絨毛消失,細(xì)胞體積縮小,胞漿凝縮,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變疏松并與胞膜融合,形成一個(gè)個(gè)空泡,核糖體與線粒體等細(xì)胞器聚集,結(jié)構(gòu)尚無(wú)明顯改變,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊,細(xì)胞核固縮呈均一的致密物,進(jìn)而斷裂成碎塊,此時(shí)細(xì)胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不斷出芽、脫落,一個(gè)細(xì)胞變成數(shù)個(gè)大小不等的有膜包裹的凋亡小體:后凋亡小體被周圍具有吞噬能力的細(xì)胞吞噬、消化。上述這些形態(tài)學(xué)的變化,可以通過(guò)本試劑盒中的染色及光學(xué)顯微鏡觀察。 計(jì)算細(xì)胞凋亡率和死亡率: 細(xì)胞凋亡率=凋亡細(xì)胞/細(xì)胞總數(shù)×100% 細(xì)胞死亡率=壞死細(xì)胞/細(xì)胞總數(shù)×100% 儲(chǔ)存:RT,避光,有效期12個(gè)月。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
芽孢桿菌分裂周期2樣蛋白激5抗體Human EIF5B ELISA Kit兔載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒
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多主葡萄殼菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體Human ELP4 ELISA Kit兔乙酰膽堿(ACh)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體Human EIF5B ELISA Kit兔胰淀(Amylin)免疫試劑盒
瓜亡革菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體Human EMB ELISA Kit兔一氧化氮合成(NOS)免疫試劑盒
平菇腫瘤/抗原74抗體Human EIF6(Eukaryotic Translation Initiation Factor 6) ELISA Kit兔一氧化氮(NO)免疫試劑盒
木糖葡糖醋桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38抗體Human EMG1 ELISA Kit兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)免疫試劑盒
釀酒酵母7號(hào)染色體開放閱讀框72抗體Human EIF3M ELISA Kit兔血小板選擇,P -選擇免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體Human EIF4A2 ELISA Kit兔血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒
鼠傷寒沙門氏菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體Human ELAC2 ELISA Kit兔血栓B2(TXB2)免疫試劑盒
猴頭菇Hericium erinaceus (Bull.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSMAD3 elisa試劑盒木栓
: =AS2.126資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSMAD2 elisa試劑盒麻醉椒苫
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:Ind GradeSHC轉(zhuǎn)化蛋白1試劑盒茅蒼術(shù)
細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測(cè)試劑盒葡聚糖凝膠G-10
其他交聯(lián)葡聚糖凝膠G-10;交聯(lián)右旋糖酐凝膠G-10
英文名稱:Sephadex G-10
其他英文名稱:Cross-inked dextran gel G-10
產(chǎn)品規(guī)格:國(guó)產(chǎn)
包裝:25克/100克
CAS號(hào):9050-68-4
干顆粒直徑:40~120um
分子量分級(jí)范圍:A.肽及球形蛋白質(zhì):~700;B. 葡聚糖(線性分子):~700
床體積毫升/克干分子篩:2~3ml/g
PH:2~13
性狀:珠粒或粉末,屬親水性凝膠。性穩(wěn)定,不溶于水、弱和堿溶液,遇強(qiáng)能使糖苷鍵分解
用途:生化研究。用于凝膠過(guò)濾,分離分子量接近的小分子,脫鹽,多肽分離,清洗生物提取液,分子量測(cè)定
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)