培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
SR9011是一種REV-ERBα/β激動劑,作用于REV-ERBα和REV-ERBβ,IC50s分別為790nM和560nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1379686-29-9 純度:99.92% 分子量:479.04 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
茶樹菇轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體Anti-IFNG Antibody透明質(zhì)合3(HAS3)ELISA試劑盒
斑玉蕈tinagl1抗體Anti-IFNG Antibody透明質(zhì)合2(HAS2)ELISA試劑盒
三線鐮刀菌辣椒受體5抗體Anti-IFNG Antibody透明質(zhì)合1(HAS1)ELISA試劑盒
糊精乳桿菌腫瘤排斥抗原gp96 1 變異體抗體Anti-IFNG Antibody透明質(zhì)基葡糖苷4(HYAL4)ELISA試劑盒
野生金針菇(白色)組織因子途徑抑制劑抗體Anti-IFNG/IFN-γ Antibody透明質(zhì)基葡糖苷3(HYAL3)ELISA試劑盒
中華根瘤菌星形瘤高表達(dá)蛋白抗體(環(huán)指蛋白100)Anti-IFNGR1 Antibody透明質(zhì)基葡糖苷2(HYAL2)ELISA試劑盒
根瘤菌微管蛋白β5抗體Anti-IFT88 Antibody透明質(zhì)基葡糖苷1(HYAL1)ELISA試劑盒
黑曲霉轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體Anti-IFNGR2 Antibody頭蛋白(NOG)ELISA試劑盒
大腸埃希菌轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體Anti-IFNGR1 Antibody戊二脫氫(OGDH)ELISA試劑盒
威林格氏線黑粉菌磷化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體Anti-IGF1 Antibody戊二受體1(OXGR1)ELISA試劑盒
釀酒酵母非受體酪蛋白激2抗體Anti-IGF1R Antibody銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(COPT2)ELISA試劑盒
串珠鐮刀菌*轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1γ抗體Anti-IGF1R Antibody銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(COPT1)ELISA試劑盒
毛殼調(diào)節(jié)染色體組裝激1抗體Anti-IGF1 Antibody銅離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATPβ肽(ATP7β)ELISA試劑盒
莖點(diǎn)霉屬翻譯控制腫瘤蛋白抗體Anti-IGF2(IGF-2) Antibody銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒
漸綠木霉腫瘤/抗原20抗體Anti-IGF2-AS Antibody銅伴侶超氧化物歧化(SOD4)ELISA試劑盒
棒狀桿菌屬線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位抗體Anti-IGF2R Antibody同種異體移植炎癥因子1(AIF1)ELISA試劑盒
5-羥色胺受體5A抗體豬霍亂沙門氏菌小鼠小腸平滑肌細(xì)胞
5-羥色胺受體7抗體立枯絲核菌(斜面)小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞
5-羥色胺受體6抗體分枝桿菌屬小鼠食管上皮細(xì)胞
ATP依賴解旋SMARCA2抗體動物雙歧桿菌乳亞種小鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞
REV-ERBα/β激動劑(SR9011)核固紅
其他細(xì)胞核堅牢紅;鈣紅;核快紅;乙二醛縮雙鄰氮基酚
英文名稱:Nuclear fast red
其他英文名稱:Calcin red;Kernechtrot;1-Amino-2,4-dihydroxyanthraquinone-3-sulfonic acid sodium salt ;C.I. 60760
產(chǎn)品規(guī)格:FMP,90%
包裝:5克
CAS號:6409-77-4
C14H8NNaO7S=357.27
級別:FMP
分光有效含量:≥90.0
層析試驗:合格
薄層層析試驗:合格
干燥失量:≤5.0%
用途:生化研究。絡(luò)合指示劑。用以測定鈣、鉻、鎂、錳、鉛和鋅等。廣泛應(yīng)用于冶金分析、土壤分析、植株分析等。
保存:RT