操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:Hsp90ATPase活性抑制劑
英文名稱:Retaspimycin Hydrochloride 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 Retaspimycin hydrochloride是一種有效的Hsp90ATPase活性抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:857402-63-2 別名:IPI-504 純度:95.0% 分子量:624.17 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
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: =ATCC7830資源名稱: 德氏乳桿菌乳亞種 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)蛻皮激
塔賓曲霉Aspergillus│tubingensis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)根皮苷
: =AS2.338資源名稱: 異常漢遜酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)梓
Hsp90ATPase活性抑制劑聚乙二800
其他 聚氧乙烯800;聚氧化乙烯800
英文名稱: PEG800
其他英文名稱: Polyethylene glycol 800
產(chǎn)品規(guī)格: CP
包裝:500克
CAS號:25322-68-3
分子式:HO(CH2CH2O)nH
級別:CP
平均分子量:770~840.0
pH(50g/L,25℃):4.0~7.0
結(jié)晶點:≥24℃
澄清度試驗:合格
灼燒殘渣:≤0.1%
性狀:或淺黃色軟蠟狀半固體或片狀。有輕微特殊氣味。微有吸濕性。遇熱易熔化。溶于水和乙
用途:生化研究。氣相色譜固定液(高使用溫度120℃,溶劑為、、二氯),分離分析、、醛等含氧化合物,聚四氟乙烯中水分,脂肪胺,揮發(fā)油。并被廣泛用作載體和毛細(xì)管柱內(nèi)壁的改性劑。有機合成。
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