培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
BiP抑制劑(HA15) | HA15 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
HA15是一個小分子BiP的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1609402-14-3 純度:99.82% 分子量:466.58 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
釀酒酵母小鼠腎損傷分子1Anti-PEX5 Antibody人烏頭2(ACO-2)ELISA試劑盒
Mesorhizobium人角蛋白20Anti-PEX3 Antibody人烏頭2(ACO-2)ELISA試劑盒
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細(xì)鏈格孢人前心鈉肽Anti-PGBD1 Antibody人受體酪激(RTKs)ELISA試劑盒
Chrysonilia sitophila大鼠組蛋白H2bAnti-PGD Antibody人絲裂原激活的蛋白激/MAP激(MAPK)ELISA試劑盒
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竹喙球菌人角蛋白13Anti-PGD Antibody人溶菌(LZM)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌大鼠N端前腦鈉Anti-PHACTR4 Antibody人溶菌(LZM)ELISA試劑盒
腫瘤壞死因子配體超家族成員7抗體黑曲霉3.3928細(xì)胞*培養(yǎng)基:
結(jié)構(gòu)蛋白家族3抗體水霉人直腸腺癌細(xì)胞(低分化)
T淋巴細(xì)胞受體α抗體黑木耳(AU110)人肺小氣道上皮細(xì)胞
選擇性胸腺細(xì)胞相關(guān)蛋白抗體靈芝菌人膽管癌細(xì)胞
BiP抑制劑(HA15)橙黃G6
其他金橙G;桔黃G;橙黃GG;性耐光桔黃;性橙10;橙黃G鈉;1-基偶氮-2-萘酚-6,8-二磺鈉;耐光橙G;橙黃G;7-羥基-8-(基偶氮基)-1,3-萘二磺二鈉鹽;性橙GG;橙G;性耐光桔黃
英文名稱:Orange G6
其他英文名稱:Orange G sodium salt;Acid orange 10;Wool orange 2G;Acid orange G;Fast light orange G ;C.I. 16230
產(chǎn)品規(guī)格:高純,80%
包裝:25克/500克
CAS號:1936-15-8
C16H10N2Na2O7S2=452.37
級別:High Purity Grade
含量:≥80.0%
Lambda Max:472~478nm
Solubility (0.002%, Water):合格
性狀:橙黃色鱗片狀結(jié)晶或黃色粉末。溶于水和乙溶液呈黃色
用途:生化研究。堿指示劑。非水溶液滴定用指示劑,分析鈣、鎂。與絡(luò)合指示劑鉻黑T組成混合指示劑,以改善后者變色的敏銳性
保存:RT