操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:MEK抑制劑(PD0325901)
英文名稱:PD0325901 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg PD0325901是一種具有選擇性的的,ATP非競爭性的MEK抑制劑,IC50值為0.33nM,是CI-1040對ERK1和ERK2磷酸化作用的500多倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:391210-10-9 別名:PD325901 純度:99.95% 分子量:482.19 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
杏鮑菇磷化p21蛋白抗體Human IL-23(Interleukin 23) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-7(SIRT7/SIR2L7)免疫試劑盒
肺形側耳磷化p21蛋白抗體Human IL-19(Interleukin 19) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-6(SIRT6/SIR2L6)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌8號染色體開放閱讀框84抗體Human IgA2(Immumoglobulin A2) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-5(SIRT5/SIR2L5)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化p21蛋白抗體Human IGF2BP3(Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-4(SIRT4/SIR2L4)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化轉錄調節(jié)因子CEBP α 抗體Human HSF2(Heat Shock Transcription Factor 2) ELISA Kit人去乙酰化Sirtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)免疫試劑盒
小紅酵母CLEC2D蛋白抗體Human HSP-70(Heat Shock Protein 70) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-1(SIRT1/SIR2L1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌富含半胱與表皮生長因子樣蛋白2抗體Human HSPβ6/HSP-20(Heat Shock Protein Beta 6) ELISA Kit人去乙酰化饑餓激(dGHRL)免疫試劑盒
球形節(jié)桿菌醌氧化還原樣蛋白1抗體Human HSPG(Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit人去唾液糖蛋白受體(ASGPR)抗體免疫試劑盒
米曲霉銅代謝結構域蛋白9抗體Human HYOU1(Hypoxia Up Regulated 1) ELISA Kit人去唾液糖蛋白受體(ASGPR)免疫試劑盒
山羊葡萄球菌濃縮2復合亞基D3抗體Human IFABP/FABP2(Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit人去甲腎上腺(NA)免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母磷化分裂周期蛋白6抗體Human IL-35(Interleukin 35) ELISA Kit人趨化因子受體3(CCR3)免疫試劑盒
泡盛曲霉磷化周期依賴激2抗體Human IFN-α(Interferon Alpha) ELISA Kit人趨化因子配體17(CXCL17)免疫試劑盒
薄層菌碳酐12抗體Human INHB(Inhibin B) ELISA Kit人趨化因子26(CCL26)免疫試劑盒
釀酒酵母泛載體蛋白R2抗體Human IgA1(Immunoglobulin A1) ELISA Kit人趨化因子2(CXCL2)免疫試劑盒
粘附分子3抗體Human IGF2BP3(Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit人趨化因子(FK)免疫試劑盒
仙芝(靈芝屬之一種)整合相關蛋白CD47Human INSL5(Insulin Like Protein 5) ELISA Kit人驅動蛋白家族成員27(KIF27)免疫試劑盒
豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質量規(guī)格:>99%,BCC1q/TNF相關蛋白3試劑盒對氧基
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質量規(guī)格:>99%,BRB因子試劑盒丁香油
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis Berliner 質量規(guī)格:BSB受體相關蛋白31試劑盒橙皮油內(nèi)酯
MEK抑制劑(PD0325901)牛胰島
英文名稱:Insulin from bovine pancreas
產(chǎn)品規(guī)格:BR,27U/mg
包裝:25毫克/100毫克/1克
CAS號:11070-73-8
C254H377N65O75S6=5733.49
級別:BR
含量:≥27 USP units/mg (HPLC)
干燥失重:≤10.0%
性狀:粉末。在水、乙、中幾乎不溶;在礦(無機)或氫氧化堿溶液中易溶。由A、B兩個肽鏈組成。堿性: 兩性,等電點pI5.35~5.45
用途:生化研究。胰島是機體內(nèi)降低血糖的,也是同時促進糖原、脂肪、蛋白質合成的。作用機理屬于受體酪激機制。
保存:-20°C