詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
EL-102 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
EL102是HIF1α的抑制劑,能夠抑制微管蛋白聚合和減少它的穩(wěn)定性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1233948-61-2 純度:99.15% 分子量:384.47 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
竹喙球菌Haloferax volcanii
猴頭菌Haloferax viridis
栗酒裂殖酵母Haloferax alexandrinus
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;?/span>Haloferax alexandrinus
大腸埃希菌Haloferax alexandrinus
黑色附球菌Haloferax alexandrinus
假單胞菌屬Haloferax alexandrinus
熒光假單胞菌Haloferax alexandrinus
赭色擲孢酵母Haloferax lucentensis
放射桿狀根瘤菌Haloferax volcanii
英諾克李斯特氏菌Haloferax alexandrinus
豇豆慢生根瘤菌Haloferax prahovense
串珠鐮孢Haloferax alexandrinus
樹舌靈芝(平蓋靈芝)Haloferax volcanii
尖頂絲膜菌Haloferax volcanii
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型Haloferax volcanii
豬白介1(IL-1)免疫試劑盒胞質(zhì)乙脫氫1抗體人白介-5(IL-5)ELISA試劑盒德爾塔林
豬白蛋白免疫試劑盒ADP核糖基化樣因子ARL3抗體人白介-5(IL-5)ELISA試劑盒燈盞花乙甲酯
豬γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒花生四烯15脂氧合1抗體人白介4(IL-4)ELISA試劑盒地奧司明
豬γ淀粉(AMY)免疫試劑盒癌增強(qiáng)蛋白2抗體人白介4(IL-4)ELISA試劑盒地膚子皂苷Ic
HIF1α抑制劑(EL-102)D-賴
英文名稱:D-Lysine
其他英文名稱:(R)-2,6-Diaminocaproic acid
產(chǎn)品規(guī)格:BR,96%
包裝:1克/5克
CAS號:923-27-3
C6H14N2O2=146.19
級別:BR
含量:≥96.0%
光學(xué)活性:?15±2°(c=1% in H2O)
性狀:粉末。熔點(diǎn):218℃
用途:生化研究
保存:RT