培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
(S)-Gossypol acetic acid是Bcl-2抑制劑,有效誘導(dǎo)過表達Bcl-2或Bcl-xL的Jurkat細胞死亡,IC50分別為18.1μM和22.9μM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1189561-66-7 別名:(S)-(+)-Gossypol acetic acid 純度:98.80% 分子量:578.61 儲存條件:-20℃避光保存于氬氣中。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鐮刀菌Bullera mrakii
聚生殼菌Debaryomyces hansenii
毛霉(加詞待譯)Cryptococcus pseudolongus
球孢白僵菌Bullera variabilis
猴頭菇Cryptococcus sp.
紅棕肉座菌Bullera oryzae
楊奇青霉Bullera sp.
苘麻大莖點菌Cryptococcus victoriae
頂青霉Pseudozyma hubeiensis
綠色糖單孢菌Pseudozyma antarctica
Passalora fulvaPseudozyma hubeiensis
釀酒酵母Cryptococcus victoriae
綠色木霉Bullera oryzae
平常假絲酵母Bullera sinensis
PseudotripoconidiumBulleromyces albus
黃綠綠僵菌*Bullera sinensis
小鼠白介16(IL-16)免疫試劑盒人β亞基人絨毛膜促性腺激(β HCG)抗體人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒三七皂苷FC
小鼠白介15(IL-15)免疫試劑盒鈣激活通道蛋白 α 1抗體人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒三七皂苷Fe
小鼠白介13(IL-13)免疫試劑盒鈣激活通道蛋白 α 1抗體人抗乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒 三七皂苷Ft1
小鼠白介12(IL-12/P70)免疫試劑盒蛇巴曲抗體人抗乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒 三七皂苷R1
Bcl-2抑制劑((S)-Gossypol acetic acid)5-溴尿苷
其他5-溴嘧啶核苷
英文名稱:5-BrU
其他英文名稱:5-Bromouridine;5-Bromouracil-1-beta-D-ribofuranoside
產(chǎn)品規(guī)格:ACS級,99%
包 裝: 250毫克/1克
CAS號:957-75-5
C9H11BrN2O6=323.10
級別:ACS Grade
含量:≥99.0%
水分:≤1.0%
性狀:粉末。溶于水:50mg/ml
用途:生化研究
保存:2~8℃