操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:HDAC6抑制劑(Citarinostat)
英文名稱:Citarinostat 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg 發(fā)貨周期:1~3天 Citarinostat是一種特異性的HDAC6抑制劑,抑制HDAC6和HDAC3,IC50值分別為4nM and76nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1316215-12-9 別名:ACY241;ACY-241;ACY 241 純度:99.06% 分子量:467.95 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
指狀青霉人胸腺白血病抗原Anti-Phospho DOK2 (Y299) Antibody人糖原合成激(GSK)ELISA試劑盒
短雙歧桿菌大鼠牛小腸堿性磷Anti-Phospho E2F1 (S364) Antibody人糖原合成激(GSK)ELISA試劑盒
金針菇小鼠促卵泡Anti-Phospho DOK2 (Tyr299) Antibody人胱天蛋白9(Casp-9)ELISA試劑盒
Lysobacter daejeonensis小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽Anti-Phospho DUSP1 (Ser296/318) Antibody人胱天蛋白9(Casp-9)ELISA試劑盒
拉米雷斯戈麥斯氏隱球酵母人腫瘤特異性移植抗原Anti-Phospho EEF1A2 (Ser358) Antibody人胱天蛋白3(Casp-3)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AAnti-Phospho EIF2AK3 (T981) Antibody人胱天蛋白3(Casp-3)ELISA試劑盒
瓦爾肯葉菌小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉Anti-Phospho ELK1 (Ser383) Antibody彈性蛋白(NE)ELISA試劑盒
中瀨畢赤酵母人足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白Anti-Phospho EPB41 (Tyr660) Antibody彈性蛋白(NE)ELISA試劑盒
杏鮑菇大鼠克拉拉蛋白Anti-Phospho ECT2 (T790) Antibody人碳酐2(CA-2)ELISA試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌大鼠腎上腺Anti-Phospho ELK3 (Ser357) Antibody人碳酐2(CA-2)ELISA試劑盒
皺褶青霉人癌易感蛋白1Anti-Phospho EPS15 (Y849) Antibody人解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)ELISA試劑盒
紅酵母屬*小鼠吡啶交聯(lián)物Anti-Phospho EPHB1 (Tyr594/604) Antibody人解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)ELISA試劑盒
折疊馬賽菌小鼠骨橋Anti-Phospho ERBIN (Tyr1104) Antibody人髓過氧化物(MPO)ELISA試劑盒
竹喙球菌人T急性淋巴母白血病相關(guān)抗原Anti-Phospho FADD (S194) Antibody人髓過氧化物(MPO)ELISA試劑盒
球孢白僵菌大鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgGAnti-Phospho FANCI (Ser556) Antibody人顆粒B(Gzms-B)ELISA試劑盒
哈茨木霉大鼠補體蛋白3Anti-Phospho G3BP1 (S232) Antibody人顆粒B(Gzms-B)ELISA試劑盒
瞬時受體電位離子通道蛋白/M亞家族抗體假根蘑菇小鼠乳腺癌細(xì)胞 (熒光標(biāo)記)
腫瘤抑制轉(zhuǎn)移候選基因3抗體玫瑰擬層孔菌中國倉鼠卵巢細(xì)胞亞株
TRIM35蛋白抗體鮑姆針層孔菌人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞
p53靶蛋白3抗體氈被孔菌屬大鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞
HDAC6抑制劑(Citarinostat)腸激
其他腸胨;腸蛋白;腸肽;腸激活;EK
英文名稱:Enterokinase
其他英文名稱:Enteropeptidase
產(chǎn)品規(guī)格:重組體
包裝:200IU
CAS號:9014-74-8
級別:Recombinant
產(chǎn)品描述: 腸激(Enterokinase, light chain)是一種高度專一性識別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白,在Lys的C端水解多肽。它可以將原轉(zhuǎn)變?yōu)橐龋部梢詫в羞@個識別序列的融合蛋白切開。由于腸激具有高度專一性,水解效率高的特點,它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā),其應(yīng)用之一是作為工具蛋白用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂,尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。本產(chǎn)品為采用重組酵母分泌表達(dá)的高純度、高活性的牛腸激,適用范圍廣(4-45oC,pH4.5-9.5),并且在各種去垢劑和變性劑存在的條件下仍具有部分活性
活力定義:在37oC,16小時內(nèi)將0.5毫克的Thioredoxin-NP-27 95%降解為NP-27所需要的量定義為1個活性單位
性狀:液體。重組體
用途:生化研究。是一種絲蛋白,它能高效專一性地水解工程菌表達(dá)的融合蛋白(識別順序是—(Asp)4Lys↓--)釋放出目的蛋白質(zhì)。由于腸激具有高度專一性,水解效率高的特點,它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā);它能夠作為蛋白特異性地識別并切割含腸激切割位點的底物,其應(yīng)用之一是作為工具蛋白用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂,尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。但天然腸激來源有限,并且從動物組織提取的腸激污染有其他蛋白,這給實際應(yīng)用帶來了困難。這就要求用基因工程方法高純度的腸激。基因工程方法的高純度腸激活性與天然相似,但腸激切割速率更快
活力:15~25 units/mg protein (biuret)
活力定義:One unit will hydrolyze 1.0 μmole of L-leucine-p-nitroanilide to L-leucine and p-nitroaniline per min at pH 7.2 at 37 °C. (At 25 °C, approx. 40% of the activity at 37 °C is obtained.) The activity obtained using L-leucine p-nitroanilide as substrate is 2-5 times that obtained with L-leucinamide as substrate
性狀:粉末。是尿的組成成分之一,為細(xì)胞內(nèi)溶體水解,廣泛分布于腎、肝、結(jié)締組織、唾液腺、結(jié)等組織中。分子量約255000
性狀:懸浮液。Suspension in 3.5 M (NH4)42SO4 solution, pH 7.7, containing 10 mM MgCl2。是尿的組成成分之一,為細(xì)胞內(nèi)溶體水解,廣泛分布于腎、肝、結(jié)締組織、唾液腺、結(jié)等組織中。分子量約255000
用途:生化研究。蛋白質(zhì)水解中的肽類之一。這類能從多肽鏈上游離的基末端(N端)由外向里逐個地把基切下。亮肽不是因為只能水解以亮(Leu)為N末端殘基的肽鍵,而是水解以亮為N末端的肽鍵速度為快才有這一名稱由來。實際上它同樣可作用于N末端的其他基。Mg2+或Mn2+是該催化作用所必需的。早期它常用于對多肽的基序列測定。
保存:2~8℃