操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:MDM2抑制劑(RO8994)
英文名稱:RO8994 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 RO8994是一種高效的選擇性MDM2抑制劑,IC50為nM(HTRF結(jié)合檢測)和20nM(MTT增殖檢測)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1309684-94-3 分子量:613.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
帶小棒鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae
草青霉Zygosaccharomyces rouxii
芽孢桿菌Hansenula subpelliculosa
潮汐藤黃色單胞菌Saccharomyces cerevisiae
南假紅細(xì)菌Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
北京擲孢酵母Saccharomyces cerevisiae
芽孢桿菌屬Saccharomyces cerevisiae
藤黃輪絲鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae
葡萄座腔菌Saccharomyces cerevisiae
稻黑孢霉Saccharomyces cerevisiae
突孢毛殼Saccharomyces cerevisiae
海藻希瓦氏菌(可訂)Saccharomyces cerevisiae
殺蛙氣單胞菌殺蛙亞種Saccharomyces cerevisiae
蝙蝠蛾擬青霉Saccharomyces cerevisiae
疣孢鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae
小鼠高半胱(Hcy)免疫試劑盒BCL7B蛋白抗體人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 平貝堿甲
小鼠肝脂(HL)免疫試劑盒堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 蘋果
小鼠肝臟型脂肪結(jié)合蛋白(L-FABP)免疫試劑盒B白血病/淋巴瘤蛋白7抗體人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒蒲公英賽
小鼠肝生長因子受體(c-MET/HGFR)免疫試劑盒先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體(常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17)人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒蒲公英甾
MDM2抑制劑(RO8994)BOC-D-纈
其他N-叔丁氧羰基-D-纈
英文名稱:Boc-D-Val-OH
其他英文名稱:Boc-D-valine;N-(tert-Butoxycarbonyl)-D-valine
產(chǎn)品規(guī)格:特純,98%
包裝:1克/5克/25克/100克
CAS號:22838-58-0
C10H19NO4=217.26
級別:Purum
含量:≥98.0%
比旋光度:+5.5~+7.5 °(C=1, AcOH)
性狀:至類細(xì)粉未晶體。熔點(diǎn):164~165℃
用途:生化研究。
保存:RT