培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
GMX1778(CHS-828)是NAMPT高效抑制劑,可抑制劑NAD_addition_的生化合成,IC50值小于25nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:200484-11-3 純度:99.65% 分子量:371.86 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
類干酪乳桿菌基質(zhì)衍生因子1抗體Anti-PAK1 Antibody磷張力蛋白同源物(PTEN)ELISA試劑盒
扶桑本森頓酵母SET結(jié)合蛋白1抗體Anti-PAK1 Antibody磷甲羥戊激(PMVK)ELISA試劑盒
小孢毛霉生長抑受體3抗體Anti-PAK1 Antibody磷肌-3-激催化亞基δ肽(PIK3Cδ)ELISA試劑盒
鹽古桿菌鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體Anti-PAK3 Antibody磷肌-3-激催化亞基β肽(PIK3Cβ)ELISA試劑盒
蘇云金芽孢桿菌胚胎干抑制蛋白Suz12抗體Anti-PAK6 Antibody磷肌-3-激2α肽(PI3K2α)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌神經(jīng)突觸1抗體Anti-PAK5 Antibody磷核糖甲酰甘脒合(PFAS)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌磷化神經(jīng)突觸1抗體Anti-PANX2 Antibody磷核糖甘酰轉(zhuǎn)甲酰基(GART)ELISA試劑盒
東邊纖細(xì)芽孢桿菌磷化神經(jīng)突觸1抗體Anti-PAPPA Antibody磷核糖咪唑羧化(PAICS)ELISA試劑盒
卡察夫氏弧菌酪蛋白激Fyn(同步原癌基因)抗體Anti-PAPPA Antibody磷甘油酯激2(PGK2)ELISA試劑盒
玫瑰產(chǎn)色鏈霉菌頂端體相關(guān)蛋白7抗體Anti-PAR4/Pawr Antibody磷甘油酯激1(PGK1)ELISA試劑盒
孔雀石(綠)鏈霉菌血清應(yīng)答因子結(jié)合蛋白1抗體Anti-Parkin(PARK2) Antibody磷甘油脫氫(PHGDH)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌磷化血清應(yīng)答因子抗體Anti-PARK7 Antibody磷甘油變位5(PGAM5)ELISA試劑盒
小笠原德克斯酵母應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1抗體Anti-PARK7 Antibody(PB0341)磷甘油變位4(PGAM4)ELISA試劑盒
芽孢桿菌14號染色體開放閱讀框174Anti-PARK7 Antibody磷甘油變位1(PGAM1)ELISA試劑盒
尖孢鐮孢中斷位點(diǎn)蛋白STIL抗體Anti-PARP2 Antibody磷甘露糖1(PMM2)ELISA試劑盒
大腸桿菌紡錘體組裝異常蛋白6抗體Anti-PARN Antibody磷甘露糖1(PMM1)ELISA試劑盒
谷受體NMDAζ1抗體布氏檸檬桿菌人角膜上皮細(xì)胞提取物
谷受體NMDAζ2抗體施氏葡萄球菌施氏亞種人體角膜成纖維細(xì)胞提取物
去甲腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體糊精片球菌人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物
還原型輔Ⅱ氧化5/煙酰胺腺嘌呤二核苷磷抗體產(chǎn)硫球鏈菌人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞提取物
NAMPT抑制劑(GMX1778)(CHS-828固紅片劑
其他固紅-萘磺TR片劑;快紅片劑;快紅TR片劑
英文名稱:Fast red TR Tablets
其他英文名稱:Fast Red TR Salt 1,5-naphthalenedisulfonate salt tablets
產(chǎn)品規(guī)格:高純
包裝:5片/25片
CAS號:51503-28-7
C17H13O6N2O6S2Cl=440.88
級別:High purity grade
含量:5/100mg tablets
Abs.@Lambda Max A (2 tab/1L Water):>1.4
Abs.@Lambda Max B (2 tab/1L Water):>0.5
灼燒殘渣:≤0.2%
性狀:綠色或黃綠色金屬光澤結(jié)晶,為品紅和副品紅(PArArosAnilinE)鹽鹽或乙鹽的混合物。200℃以上分解。溶于乙和戊,微溶于水。溶于酒精呈紅色;溶于熱水呈紅紫色,遇濃硫呈黃棕色,稀釋后幾乎無色;水溶液加氫氧化鈉液呈帶有紅色沉淀的幾乎無色的液體。大吸收波長(乙中)543nm(ε93000)。有毒
用途:生化研究。用于配制席夫試劑檢測醛類,用于萃取光度法測定某些根離子及金屬離子。也用于光度法檢測溴,亞硝鹽和二氧化硫。用作極譜分析中的極大抑制劑。還用作生化分析的核染料,為強(qiáng)的核染料。能使粘朊、彈性組織和嗜品紅的顆粒染色。神經(jīng)的核染色;學(xué)中用以鑒別結(jié)核桿菌;分析化學(xué)中配制席夫試劑檢驗(yàn)醛類。用溴鹽滴定的氧化還原指示劑
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