詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑(Azaserine)
英文名稱(chēng):Azaserine 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg 發(fā)貨周期:1~3天 Azazerine是競(jìng)爭(zhēng)性谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):115-02-6 別名:CN-15757;CI-337;O-Diazoacetyl-L-serine;P-165 純度:99.91% 分子量:173.13 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
棲藻海桿狀菌Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
紫荊假諾卡氏菌Candida guilliermondii
佛雷德里克斯堡假單胞菌Saccharomyces cerevisiae
棕灰口蘑Candida kefyr
嗜油假單胞菌Saccharomyces cerevisiae
大腸埃希菌Candida valida
土星擬威爾酵母Pichia farinosa
蘇云金芽孢桿菌Pichia farinosa
小單孢菌Pichia membranifaciens
香菇*Saccharomyces cerevisiae
阿木吉氏鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae
太湖類(lèi)芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae
脆弱擬桿菌Saccharomyces cerevisiae
絳紅褐游動(dòng)放線(xiàn)菌Saccharomyces bayanus
米曲霉Saccharomyces cerevisiae
小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒 黃芪甲苷
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒 黃芪皂苷I
小鼠髓過(guò)氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體 免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 黃芪皂苷II
小鼠髓過(guò)氧化物(MPO)免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 黃芪皂苷III
谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑(Azaserine)DL-谷酰胺
其他DL-羰基??;DL-酰胺;DL-谷酰胺
英文名稱(chēng):DL-Glutamine
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:5克/25克
CAS號(hào):6899-04-3
C5H10N2O3=146.15
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:0o
干燥失重:≤0.3%
重金屬:≤10ppm
氯化物:≤0.02%
硫鹽:≤0.02%
銨鹽:≤0.1%
砷鹽:≤2ppm
鐵:≤10ppm
性狀:結(jié)晶粉末或棱柱體結(jié)晶。18℃時(shí),1g溶于38.5ml水。熔點(diǎn)185-186℃(173-174.5℃)。
用途:生化研究
保存:RT,避光