培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
JNK抑制劑(JNK-IN-8) | JNK-IN-8 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱(chēng):JNK-IN-8 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg JNK-IN-8是一種有效的JNK抑制劑,抑制JNK1,JNK2和JNK3,IC50分別為4.7nM,18.7nM和1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1410880-22-6 純度:99.83% 分子式:C??H??N?O? 分子量:507.59 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
釀酒酵母乙?;M蛋白H2B抗體Human SLC38A1 ELISA Kit大鼠KI-67 免疫試劑盒
膠凍樣芽胞桿菌乙?;M蛋白H2B抗體Human SLC25A34 ELISA Kit大鼠Kelch樣ECH相關(guān)蛋白1(KEAP1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化組蛋白H2AX抗體Human SLC25A33 ELISA Kit大鼠I型膠原(COL1)免疫試劑盒
平田頭菇6-2磷化熱休克蛋白27抗體Human SLC25A45 ELISA Kit大鼠II型角蛋白,骨架71(KRT71)免疫試劑盒
藤黃毛殼磷化熱休克蛋白70抗體Human ATP6AP2(Renin receptor) ELISA Kit大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)免疫試劑盒
焦曲霉磷化熱休克因子1抗體Human SLC27A2 ELISA Kit大鼠GTP KRas 免疫試劑盒
釀酒酵母磷化熱休克因子1抗體Human SLC25A46 ELISA Kit大鼠Ghrelin受體(Ghsr)免疫試劑盒
雜色云芝磷化熱休克蛋白70抗體Human SLC27A3 ELISA Kit大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)免疫試劑盒
桔青霉E3泛蛋白連接HACE1抗體Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) ELISA Kit大鼠F-肌動(dòng)蛋白免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體Human SLC22A15 ELISA Kit大鼠FMS樣酪激3配體(Flt3L)免疫試劑盒
松口蘑肝核因子4α抗體Human SLAIN2 ELISA Kit大鼠FMS樣酪激3(Flt3)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化肝核因子4α抗體Human SLAMF7 ELISA Kit大鼠FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉相關(guān)蛋白1(FRAP1)免疫試劑盒
鮑魚(yú)側(cè)耳淋巴特異性解旋抗體Human SLC10A3 ELISA Kit大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)免疫試劑盒
竹針孢座囊菌HRAS樣抑制因子2抗體Human SLC12A4 ELISA Kit大鼠ERp57 免疫試劑盒
梨多細(xì)菌源菌熱休克蛋白家族40抗體Human SLC12A2(Solute carrier family 12 member 2) ELISA Kit大鼠E3-RSIκB 免疫試劑盒
嗜鹽動(dòng)性球菌糖蛋白P43抗體Human SLC13A4 ELISA Kit大鼠D-乳脫氫(D-LDH)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%白樺脂
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus Frankland and Frankland 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%白樺脂
冰島硫化葉菌Sulfolobus│islandicus 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%羽扇豆
JNK抑制劑(JNK-IN-8)鄰聯(lián)茴香胺
其他聯(lián)大茴香胺;二甲氧聯(lián)胺;3,3′-二甲氧基-4,4′-二基聯(lián);1,4-二疊氮雙環(huán)[2.2.2]辛烷
英文名稱(chēng):3,3'-Dimethoxybenzidine
其他英文名稱(chēng):o-Dianisidine;Fast blue B
產(chǎn)品規(guī)格:超純,98%
包裝:5克/25克/100克/500克
CAS號(hào):119-90-4
C14H16N2O2=244.29
級(jí)別:Ultra purity grade
含量:≥98.0%
水溶解試驗(yàn):合格
性狀:至淺灰色粉末,熔點(diǎn) 268℃。聯(lián)大茴香胺o-Dianisidine (3,3'-dimethoxybenzidine) 在ELISA免中是過(guò)氧化物的底物。 該底物產(chǎn)生桔黃色的可溶性的末端產(chǎn)物,能在405 nm處被分光光度計(jì)讀取,該反應(yīng)可用5 M HCl終止
用途:生化研究。用于藍(lán)色偶氮染料,如直接湖藍(lán)6B、活性深藍(lán)KD-7G。還被用來(lái)檢定鈷、銅、金、釩、硫氰鹽,測(cè)定金和亞硝鹽。氧化還原指示劑。絡(luò)合指示劑。偶氮染料。
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