詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白Eg5抑制劑(Monastrol)
英文名稱:Monastrol 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg 發(fā)貨周期:1~3天 Monastrol是具有高效性和細(xì)胞滲透性的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白Eg5的抑制劑,IC50值為14μM. 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):329689-23-8 別名:(±)-Monastro 純度:99.89% 分子量:292.35 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
南擬酵母Bacillus thuringiensis巨噬移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒
產(chǎn)黃青霉Bacillus thuringiensis駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒
瓶孢野野村氏菌Bacillus thuringiensis駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒
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釀酒酵母橢圓變種Bacillus thuringiensis駱駝脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒
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香菇Bacillus thuringiensis駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒
墻壁圣格奧爾根菌Bacillus thuringiensis馬生長(zhǎng)激(GH)ELISA試劑盒
乳球菌屬Bacillus thuringiensis馬生長(zhǎng)激(GH)ELISA試劑盒
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核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體戈?duì)柕伦鶜ゆ吒窭扑雇郀柕骆?zhèn)磁螺菌
細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體鉛色青霉魯氏少根根霉
Sema6A抗體華麗曲霉產(chǎn)黑普雷沃氏菌
S100A9抗體灰綠曲霉中華石花菌
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白Eg5抑制劑(Monastrol)L-天冬二甲酯鹽鹽
其他L-天門冬二甲酯鹽鹽
英文名稱:L-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride
其他英文名稱:(S)-Aminosuccinic Acid Dimethyl Ester Hydrochloride;Dimethyl (S)-Aminosuccinate Hydrochloride;Dimethyl L-Asparaginate Hydrochloride;Dimethyl L-Aspartate Hydrochloride;L-Asparaginic Acid Dimethyl Ester
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:25克/100克/500克
CAS號(hào):32213-95-9
C6H11NO4•HCl=197.62
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):113~118℃
比旋光度:+14.7~+14.9°(C=1,CH3OH)
性狀:結(jié)晶粉末
用途:生化研究
保存:RT