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詳細(xì)介紹
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
小鼠輸尿管成纖維細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1848 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠小腦顆粒細(xì)胞 | BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 |
血管內(nèi)皮生長因子單克隆抗體 | Cy5.5標(biāo)記的EDC3蛋白抗體 |
U251 MG/TMZ+LUC(3000)人類星形膠質(zhì)瘤耐細(xì)胞熒光標(biāo)記 | Cy5.5標(biāo)記的CULLIN抗體 |
U266人骨髓瘤細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體 |
U87MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 | Cy5.5標(biāo)記的線粒體核糖體蛋白S17抗體 |
U87MG+RFP人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤+RFP | Cy5.5標(biāo)記的磷化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體 |
U-937 人淋巴瘤細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的嗅覺受體52B2抗體 |
UM-UC-3人膀胱移行細(xì)胞癌 | Cy5.5標(biāo)記的T淋巴細(xì)胞負(fù)調(diào)節(jié)蛋白抗體 |
VCAP人前列腺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的雙甲基精氨水解1抗體 |
WERI-RB-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的信號通路Wnt3a抗體 |
WM-115人黑瘤細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的MFSD8蛋白抗體 |
WPMY-1人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞 | 小鼠輸尿管成纖維細(xì)胞Cy5.5標(biāo)記的鈣調(diào)蛋白OCM2抗體 |
WRL68人正常肝細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的肌醇六磷激1抗體 |
XWLC-05云南宣威人肺腺癌細(xì)胞系 | Cy5.5標(biāo)記的磷化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體 |
BAF3小鼠原B細(xì)胞株 | Cy5.5標(biāo)記的富含亮氨重復(fù)蛋白26抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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