培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Rigosertib sodium是一種PLK1的ATP非競(jìng)爭(zhēng)型抑制劑,IC50值為9nM,選擇性是對(duì)PLK2的30多倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):592542-60-4 別名:ON-01910 sodium 純度:99.09% 分子量:473.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
黃曲霉*絲/蘇蛋白激NEK8抗體Human LTB4R(Leukotriene B4 receptor 1) ELISA Kit人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)ELISA試劑盒
*灰葡萄孢核孔蛋白Nup37抗體Human AGRP(Agouti-related protein) ELISA Kit人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒
漫游孢囊菌屬核結(jié)構(gòu)蛋白5抗體Human GHSR(Growth hormone secretagogue receptor type 1) ELISA Kit軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌 B核苷結(jié)合蛋白1抗體Human PPY(Pancreatic prohormone) ELISA Kit軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM)ELISA試劑盒
稻麥穗孢霉核苷結(jié)合蛋白2抗體Human SERPINA3(Alpha-1-antichymotrypsin) ELISA Kit軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA試劑盒
無(wú)花果曲霉乙酰基轉(zhuǎn)移10抗體Human APOE(Apolipoprotein E) ELISA Kit軍團(tuán)菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA試劑盒
芹側(cè)耳(杏鮑菇)絲/蘇蛋白激Nek7抗體Human AGT(Angiotensinogen) ELISA Kit卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒
傳染性法氏囊病病神經(jīng)正五聚體1抗體Human CTNNβ1(Catenin beta-1) ELISA Kit聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒
金太陽(yáng)杏葉細(xì)菌性穿孔病煙酰核苷轉(zhuǎn)氫抗體Human SERPINA3(Alpha-1-antichymotrypsin) ELISA Kit巨噬移動(dòng)因子(MIF)ELISA試劑盒
青灰紅菇利鈉肽受體B抗體Human AGT(Angiotensinogen) ELISA Kit巨噬移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒
金黃殼囊孢菌利鈉肽受體C抗體Human CTNNβ1(Catenin beta-1) ELISA Kit巨噬炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌磷化谷受體2B抗體Human APOE(Apolipoprotein E) ELISA Kit巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒
木糖葡萄球菌磷化谷受體2B抗體Human HIF1A(Hypoxia-inducible factor 1-alpha) ELISA Kit巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒
木霉NADPH氧化2抗體Human MAP2K5(Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 5) ELISA Kit巨噬炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒
構(gòu)巢曲霉NADPH氧化活化蛋白1抗體Human IAPP(Islet amyloid polypeptide) ELISA Kit巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒
孢小克銀漢霉輪生變種磷化核因子抗體Human NOS3/eNOS(Nitric oxide synthase, endothelial) ELISA Kit巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒
綠色木霉=木木霉Trichoderma│viride 質(zhì)量規(guī)格:BR,RZ>2.5,活性>250U/mg槲皮苷
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥500IU/mg,BR,牛源提取槲皮
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥3TIU/mg,進(jìn)分,來(lái)源: 牛肺或牛胰花旗松;二氫槲皮
PLK1抑制劑(Rigosertib sodium)精胺
其他 O,O'-二甲基硫代磷酰胺;精堿;精;N,N′-雙(3-基基)-1,4-丁二胺;α,δ-雙(γ-基)丁烷;1,12-二基-4,9-二氮十二烷
英文名稱: Spermine
其他英文名稱: N,N'-Bis(3-aminopropyl)-1,4-butanediamine;Gerontine;Musculamine
產(chǎn)品規(guī)格: 生物技術(shù)級(jí),97%
包裝:1克/5克
CAS號(hào):71-44-3
C10H26N4=202.34
級(jí)別:Biothnology grade
含量:≥97.0%
熔點(diǎn):28~30℃
沸點(diǎn):150℃/5 mmHg
性狀:清澈或無(wú)定形半固體或淡黃色至黃色油狀液體或針狀結(jié)晶。易吸潮。呈強(qiáng)堿性反應(yīng)。能從空氣中吸收 二氧化碳。溶于水、低級(jí)類和,幾乎不溶于和石油醚。閃點(diǎn)≥110℃。有腐蝕性
用途:生化研究。工農(nóng)業(yè)上可作為有機(jī)磷農(nóng)藥中間體。同時(shí),是典型的陰離子表面活性劑,具有良好的滲透、乳化、泡沫和去污能力
保存:2~8℃,避光