詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CCT245737 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
CCT245737是一個(gè)強(qiáng)的,ATP競爭的CHK1抑制劑,IC50值是30-220nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1489389-18-5 純度:99.17% 分子量:379.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
毛木耳(紫木耳、黃背木耳)同源盒蛋白MEIS3抗體Human NEK11 ELISA Kit切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒
支氣管敗血波氏菌顆粒分化蛋白抗體Human NEK3 ELISA Kit鞘脂激活蛋白原(PSAP)ELISA試劑盒
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌單氧化A+B抗體Human NEK9 ELISA Kit鞘磷脂(SM)ELISA試劑盒
白僵菌膜蛋白相互作用蛋白RGS16抗體Human NELF ELISA Kit鞘激1(SPK1)ELISA試劑盒
釀酒酵母膜型絲蛋白2抗體Human CDKN2A(Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A, isoforms 1/2/3) ELISA Kit鞘(SPH)ELISA試劑盒
米曲霉多藥耐藥相關(guān)蛋白8/9/14抗體Human CCK(Cholecystokinin) ELISA Kit橋粒芯糖蛋白3(Dsg-3)ELISA試劑盒
球毛殼Mob1同源蛋白MOBKL2B抗體Human NOG(Noggin) ELISA Kit橋粒芯糖蛋白2(DSG2)ELISA試劑盒
大腸埃希菌Mob1同源蛋白MOBKL2C抗體Human NKTR ELISA Kit橋粒芯糖蛋白1(Dsg-1)ELISA試劑盒
皺紋假單胞菌復(fù)合型表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Human NKRF ELISA Kit橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒
香菇屬(大斗菇)低密度脂蛋白受體的誘導(dǎo)降解蛋白抗體Human PTHLH(PaRathyroid hormone-related protein) ELISA Kit橋粒糖蛋白2(DSC2)ELISA試劑盒
釀酒酵母鋅指蛋白144抗體Human NLRX1 ELISA Kit羥脯糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒
細(xì)鏈格孢生肌決定因子Myf5抗體Human NLRP2 ELISA Kit羥脯(Hyp)ELISA試劑盒
蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)磷化生肌決定因子Myf5抗體Human NMD3 ELISA Kit羥賴糖苷(HOLG)ELISA試劑盒
沙福芽孢桿菌黑皮質(zhì)2受體輔助蛋白2抗體Human NFIL3 ELISA Kit羥賴(Hyl)ELISA試劑盒
頭狀葡萄球菌金屬硫蛋白3抗體Human HSPD1/HSP-60(60 kDa heat shock protein, mitochondrial) ELISA Kit羥甲基戊二單酰還原(HMG-CoAR)ELISA試劑盒
土生類諾卡氏菌絲裂原活化蛋白激MAP4K6抗體Human NEK11 ELISA Kit羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)ELISA試劑盒
金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)鹽川芎
沙門氏菌Salmonella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:刪除;精神管制川芎
: =CCUG48939=DSM17733=JCM14309資源名稱: 埃塞俄比亞涅斯特連科氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR川楝
CHK1抑制劑(CCT245737)聚乙二2000
其他 聚氧乙烯2000;聚氧化乙烯2000
英文名稱: PEG2000
其他英文名稱: Polyethylene glycol 2000
產(chǎn)品規(guī)格: 色固
包裝:100克
產(chǎn)品規(guī)格: CP
包裝:500克
CAS號:25322-68-3
分子式:HO(CH2CH2O)nH
級別:色固
平均分子量:1900.0~2200.0
結(jié)晶點(diǎn):≥46℃
流失試驗(yàn):合格
高使用溫度:120℃
級別:CP
pH(50g/L,25℃):4.0~7.0
結(jié)晶點(diǎn):43~48℃
澄清度試驗(yàn):合格
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.2%
性狀:或淺黃色蠟狀固體或片狀。有輕微特殊氣味。溶于水和。凝固點(diǎn)48~52℃
用途:生化研究。氣相色譜固定液(高使用溫度120℃,溶劑為、、二氯),分離分析、、醛等含氧化合物,聚四氟乙烯中水分,脂肪胺,揮發(fā)油。并被廣泛用作載體和毛細(xì)管柱內(nèi)壁的改性劑。有機(jī)合成。
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