培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
GDC-0339是Pim激酶抑制劑,作用于BaF3PIM1時,IC50為43.6nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1428569-85-0 分子量:465.5 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
美澳型核果褐腐病菌Eremothecium ashbyii
諾爾氏菌屬Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Saccharomyces rouxii
枯草芽胞桿菌Saccharomyces cerevisiae
枝芽胞菌Saccharomyces rouxii
香菇18Hansenula anomala
嗜鹽芽孢桿菌Pichia membranifaciens
綠白鏈孢囊菌還原亞種Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Yarrowia lipolytica
魯氏毛霉Yarrowia lipolytica
白僵菌Yarrowia lipolytica
膠孢Candida rugosa
大腸埃希氏菌Yarrowia lipolytica
鲇愛德華氏菌Candida guilliermondii
Candida rugosa
伸長鹽單胞菌*Candida guilliermondii
小鼠促有絲分裂因子(MF/MPF)免疫試劑盒腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒青陽參苷元B
小鼠促性腺激釋放激(GnRH)免疫試劑盒膽鹽激活脂肪抗體人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒
小鼠促生長激釋放激(GHRH)免疫試劑盒3-羥丁脫氫抗體人抗IVIgG抗體ELISA試劑盒氫化原阿片堿
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)免疫試劑盒長鏈脂肪酰基水解抗體人抗IVIgG抗體ELISA試劑盒氫東莨菪堿
Pim激酶抑制劑(GDC-0339)9-基吖啶鹽鹽一水合物
其他 一水合鹽-9-基吖啶
英文名稱: 9-Aminoacridine hydrochloride monohydrate
產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%
包 裝: 5克/25克
CAS號:52417-22-8
C13H10N2•HCl•H2O=248.71
級別:BR
含量:≥99%
干燥失重:≤8.0%
性狀:淡黃色結(jié)晶性粉末,呈中性,一水合物在150℃失水,溶于水;飽和溶液為淡黃色,顯藍(lán)綠色熒光。溶于乙;幾乎不溶于甲、吡啶和。熔點(diǎn):300℃
用途:生化研究。 用于監(jiān)測真核細(xì)胞內(nèi)pH的變化
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