培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
TGX-221是一種高效的、選擇性的、細(xì)胞膜滲透的PI3K p110β抑制劑,常用于癌癥治療。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:663619-89-4 純度:99.78% 分子量:364.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
*銅綠假單孢菌堿性磷(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VCP Antibody(PB0477)蛋白激R(PKR)ELISA試劑盒
鐮刀菌屬生物標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VDAC3 Antibody蛋白激N2(PKN2)ELISA試劑盒
亮白曲霉Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VDR Antibody(PB0479)蛋白激N1(PKN1)ELISA試劑盒
榛子枝枯病Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VDR Antibody蛋白激D2(PKD2)ELISA試劑盒
植物乳桿菌Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VCAM1 Antibody蛋白激D1(PRKD1)ELISA試劑盒
釀酒酵母PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFA Antibody蛋白激Cι(PKCι)ELISA試劑盒
平臍蠕孢菌PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGF-C Antibody蛋白激Cθ(PKCθ)ELISA試劑盒
根霉屬的菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFA Antibody蛋白激Cη(PKCη)ELISA試劑盒
嗜根寡養(yǎng)單胞菌APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFA Antibody蛋白激Cζ(PKCζ)ELISA試劑盒
山崎鏈霉菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFA Antibody蛋白激Cε(PKCε)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFB Antibody蛋白激Cδ(PKCδ)ELISA試劑盒
畜肉和水產(chǎn)品鮮度及木耳檢測設(shè)備PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFA Antibody(PB0084)蛋白激Cγ(PKCγ)ELISA試劑盒
pUG6PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFB Antibody蛋白激Cβ1(PKCβ1)ELISA試劑盒
嗜硝假絲酵母生物標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-VIL1 Antibody蛋白激Cα相互作用蛋白1(PICK1)ELISA試劑盒
冬菇辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-VEGFB Antibody蛋白激Bγ(PKBγ)ELISA試劑盒
盤孢屬Cy5標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-VEGFB Antibody蛋白激Bβ(PKBβ)ELISA試劑盒
胎盤特異基因8蛋白抗體乳乳球菌乳亞種小鼠卵巢組織提取物
早幼粒細(xì)胞白血病鋅指蛋白抗體腸膜明串珠葡萄聚糖亞種小鼠子宮組織提取物
蛋白調(diào)解因子10抗體青枯假單胞菌小鼠子宮頸組織提取物
Rho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1抗體食神鞘桿菌小鼠輸尿管組織提取物
PI3K p110β抑制劑(TGX-221)酚酞單磷環(huán)己胺鹽
其他 酚酞單磷二環(huán)己胺鹽;酚酞磷雙環(huán)己烷銨鹽
英文名稱: Phenolphthalein monophosphate bis(cyclohexylammonium) salt
其他英文名稱: Phenolphthalein monophosphate dicyclohexylammonium salt
產(chǎn)品規(guī)格: BR,90%
包裝:1克
CAS號:14815-59-9
C20H15O7P • 2C6H13N=596.65
級別:Biothnology grade
含量:≥90.0%
性狀:結(jié)晶粉末。
用途:生化研究。為生化檢測試劑(如測定堿性磷基)
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