詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:PI3Kα抑制劑(GDC-0326)
英文名稱:GDC-0326 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 GDC-0326是有效,選擇性的PI3Kα抑制劑,Ki值為0.2nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1282514-88-8 純度:99.31% 分子量:382.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
大豆慢生根瘤菌Corynebacterium ammoniagenes
簡單青霉Corynebacterium ammoniagenes
大腸埃希菌Corynebacterium ammoniagenes
黃傘Rhizobium radiobacter
大田鞘盒菌Clostridium sp.
蒼白桿菌屬Clostridium sp.
紫紅牛肝菌Clostridium sp.
天藍(lán)色鏈霉菌Clostridium sp.
釀酒酵母Clostridium sp.
糞腸球菌Clostridium sp.
枯斑擬盤多毛孢Clostridium sp.
無色桿菌Clostridium sp.
蒼白彎孢Acetanaerobacterium elongatum
根瘤菌Acetobacter pasteurianus
新月彎孢Acetobacterium bakii
銅綠假單胞菌Acetobacterium malicum
小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒陰離子交換蛋白2抗體人趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒多烯紫杉
小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)免疫試劑盒鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體人趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒莪術(shù)
小鼠腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)免疫試劑盒三磷腺苷家族蛋白3A抗體人堿性成纖維生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒莪術(shù)二
小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)免疫試劑盒載脂蛋白J抗體人堿性成纖維生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒莪術(shù)呋喃二烯
PI3Kα抑制劑(GDC-0326)D-高
其他D-基丁;R-基丁
英文名稱:D-Homophenylalanine
其他英文名稱:(R)-2-Amino-4-phenylbutyric acid;(R)-alpha-Amino-benzenebutanoic acid;(-)-2-Amino-4-phenylbutyric acid;H-D-HoPhe-OH
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:1克/5克/25克
CAS號(hào):82795-51-5
C10H13NO2=179.22
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
性狀:粉末。熔點(diǎn)≥300℃。比旋光度-45o
用途:生化研究。
保存:RT