培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
EZH2抑制劑(EI1) | EI1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
EI1是一種新穎的,有效的EZH2抑制劑,能夠作用于EZH2(WT)和EZH2(Y641F),IC50值分別為15nM和13nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1418308-27-6 別名:Ezh2 inhibitor 純度:96.34% 分子量:390.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
新月彎孢Anti-HNRNPA0 pAb人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒
長(zhǎng)孢鏈霉菌Anti-hnRNP L Antibody人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒
黃絮鱗鵝膏菌Anti-HNRNPD Antibody人抗肝PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒
運(yùn)動(dòng)替斯崔納菌Anti-HNRNPC Antibody人抗肝PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒
水棲黃桿菌Anti-HNRNPD Antibody人蛋白3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒
檸檬色短小桿菌Anti-HNRNPD(AUF1) pAb人蛋白3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒
葡萄座腔菌Anti-HNRNPM Antibody人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒
緣彎孢Anti-HNRNPH1 Antibody人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒
木糖氧化無(wú)色桿菌Alexa Fluor 350標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HNRNPH2 Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA試劑盒
牛病性腹瀉病熒光Cy3標(biāo)記兔抗FITCAnti-HNRNPLL Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA試劑盒
異常漢遜酵母熒光PE-Cy3標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HORMAD1 Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌熒光PE-Cy3標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HNRNPUL2 Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA試劑盒
球形芽胞桿菌熒光Cy3標(biāo)記羊抗人IgAAnti-HNRNPUL2 Antibody人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒
多主葡萄殼菌Alexa Fluor 350標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HOXA7 Antibody人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒
土曲霉Alexa Fluor 350標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HNRPLL Antibody人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒
伊氏利斯特氏菌生物標(biāo)記牛血清白蛋白Anti-HOXB1 Antibody人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒
PSD95結(jié)合蛋白2抗體產(chǎn)黃青霉人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞
PSD95結(jié)合蛋白4抗體阿達(dá)青霉人胰腺癌細(xì)胞系
SCK蛋白抗體棉鈴蟲(chóng)擬青霉大鼠甲狀腺細(xì)胞
神經(jīng)組織特異性F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白2抗體玫煙色擬青霉彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
EZH2抑制劑(EI1)丁酰膽堿酯
英文名稱(chēng):BCHE
其他英文名稱(chēng):BuCHE ;Cholinesterase,butyryl(Horse serum) ;Acylcholine acyl-hydrolase;Choline esterase, butyryl;Pseudocholinesterase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,4u/mg
包裝:500U
CAS號(hào):9001-08-5
分子量:~440000
級(jí)別:BR
活力:≥4units/mg
產(chǎn)品描述:It catalyzes the hydrolysis of a number of choline esters according to the following reaction:Acylcholine+H2O to choline+acid.It is a tetrameric glycoprotein with four subunits of equal size,each having a molecular weight of 110KDa.Butyryl cholinesterase hydrolyzes butyrylcholine four times more rapidly than acetylcholine.It is inhibited by 10-5 M physostigmine,numerous organophosphate esters,the carbamate derivates and quaternary ammonium saltsunit hydrolyzes 1umole of acetylchoine per minute at 25℃, pH7.4
性狀:淡褐色粉末。膽堿酯有2種:AChE和丁酰膽堿酯(BuChE)。兩者的基因結(jié)構(gòu)、基序列及空間三維結(jié)構(gòu)均顯示了很高的同源性。二者的主要差異在于,AChE水解乙酰膽堿(ACh)和乙酰硫代膽堿(ATCh)比酰膽堿(PrCh)快,對(duì)丁酰膽堿(BuCh)和丁酰硫代膽堿(BuTCh)沒(méi)有明顯的水解作用。丁酰膽堿酯與乙酰膽堿酯的顯色反應(yīng)原理是*一樣的。丁酰膽堿酯具有靈敏度更高的優(yōu)點(diǎn)
用途:生化研究。是一類(lèi)糖蛋白,水解乙膽堿。是生物神經(jīng)傳導(dǎo)中的一種關(guān)鍵性,同時(shí)又是有機(jī)磷和基甲酯殺蟲(chóng)劑的靶標(biāo)。可以使包含有神經(jīng)毒劑、殺蟲(chóng)劑和化學(xué)熔劑的有機(jī)磷酯中性化,從而不受神經(jīng)毒劑的侵?jǐn)_
保存:2~8℃