詳細(xì)介紹
商品介紹:
Biotin-VAD-FMK是可滲透細(xì)胞的,不可逆的,由生物素標(biāo)記的胱天蛋白酶抑制劑,用于鑒定細(xì)胞裂解物中的半胱天冬酶活性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1135688-15-1 純度:98.0% 分子量:672.81 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Biotin-VAD-FMK | 1mL(10mM)|1mg|5mg | 1~3天 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)免疫試劑盒BRD1蛋白抗體人庚型肝炎病IgM(HGV-IgM)ELISA試劑盒甜菊苷
小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒BRPF3蛋白抗體人庚型肝炎病IgM(HGV-IgM)ELISA試劑盒甜菊雙糖苷
小鼠Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒BXDC1蛋白抗體人輸血傳播病/辛型肝炎病((TTV)ELISA試劑盒鐵冬青
小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒腦蛋白44抗體人輸血傳播病/辛型肝炎病((TTV)ELISA試劑盒通關(guān)藤苷G
胱天蛋白酶抑制劑(Biotin-VAD-FMK)5-碘-2-脫氧胞苷
其他碘脫氧胞苷;伊巴他濱;5-碘-2'-脫氧胞嘧啶核苷
英文名稱:5-IDC
其他英文名稱:5-Iodo-2-Deoxycytidine;4-Amino-1-[(2R,4S,5R)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-iodopyrimidin-2-one
產(chǎn)品規(guī)格:超純,99%
包 裝: 250毫克/1克
CAS號(hào):611-53-0
C9H12IN3O4=353.11
級(jí)別:Ultra Pure Grade
含量:≥99.0%
熔點(diǎn):179~182℃
性狀:晶體或粉末
用途:生化研究
保存:-20℃