培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
AZD5582是二聚化Smac mimetics,IAPs抑制劑,對(duì)cIAP1,cIAP2和XIAP的IC50值分別為15,21和15nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1258392-53-8 純度:99.47% 分子量:1015.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
褐粘褶菌微小染色體維持缺陷蛋白3抗體Human NEDD4L ELISA Kit皮質(zhì)抑/皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)ELISA試劑盒
Marella endophytica基質(zhì)金屬蛋白-26抗體Human HK1(Hexokinase-1) ELISA Kit皮質(zhì)/腎上腺(CORT)ELISA試劑盒
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌絲裂原活化蛋白激激4抗體Human NEK3 ELISA Kit皮質(zhì)(CORT)ELISA試劑盒
白僵菌MYOZ抗體Human NEK11 ELISA Kit皮質(zhì)-3(Cortxin-3)ELISA試劑盒
毛柄金錢菌(金針菇)單核趨化蛋白2抗體Human NDUFS1 ELISA Kit皮質(zhì)類固結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA試劑盒
黃曲霉甲基化樣蛋白11抗體(N端)Human NEK9 ELISA Kit皮質(zhì)(Cortisol)ELISA試劑盒
大雙歧桿菌大腸癌腫瘤突變蛋白抗體Human NDUFS3 ELISA Kit皮膚淋巴相關(guān)抗原(CLA)ELISA試劑盒
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多變毛霉甲肽水解抗體Human NDUFS5 ELISA Kit皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒
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溜曲霉磷化絲裂原活化蛋白激激3抗體Human FOXO3(Forkhead box protein O3) ELISA Kit胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA試劑盒
粘性放線菌絲裂原活化蛋白激激5抗體Human NDUFV1 ELISA Kit泡狀過表達(dá)癌癥促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)ELISA試劑盒
戈壁發(fā)鏈霉菌磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human XDH(Xanthine dehydrogenase/oxidase) ELISA Kit膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒
黑曲霉磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human MYBBP1A(Myb-binding protein 1A) ELISA Kit膀胱癌抗原(UBC)ELISA試劑盒
鏈格孢磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human TLR4(Toll-like receptor 4) ELISA Kit排序連接蛋白3(SNX3)ELISA試劑盒
總狀共頭霉磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human MYBPC1 ELISA Kit帕金森氏病2Parkin(Park2)ELISA試劑盒
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí);紫杉
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分sigma左旋多巴
堅(jiān)強(qiáng)芽胞桿菌Bacillus│firmus 質(zhì)量規(guī)格:>98%芝麻林
二聚化Smac mimetics,IAPs抑制劑聚乙二10000
其他 聚氧乙烯10000;聚氧化乙烯10000
英文名稱: PEG10000
其他英文名稱: Polyethylene glycol 10000
產(chǎn)品規(guī)格: AR
包裝:250克/20公斤
產(chǎn)品規(guī)格: 色固
包裝:100克
CAS號(hào):25322-68-3
分子式:HO(CH2CH2O)nH
級(jí)別:AR
平均分子量:9000~12500
pH(50g/L,25℃):4.5~7.5
結(jié)晶點(diǎn):56~63℃
色度(250g/L):≤20 APHA
度:合格
粘度(210°F):1000~1750cSt
級(jí)別:色固
相對(duì)極性:++++
性狀:或微黃色蠟狀固體或?yàn)槠瑺?。溶于水。閃點(diǎn)≥240℃
用途:生化研究。氣相色譜固定液(高使用溫度130℃,溶劑為、、二氯),分離分析、、醛等含氧化合物,聚四氟乙烯中水分,脂肪胺,揮發(fā)油。并被廣泛用作載體和毛細(xì)管柱內(nèi)壁的改性劑。有機(jī)合成。
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