培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
NU7026是一種新型特異性的DNA-PK抑制劑,IC50為0.23±0.01μM,也抑制PI3K,IC50為13±3μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):154447-35-5 別名:LY293646 純度:99.94% 分子量:281.31 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
桔青霉磷葡萄糖內(nèi)酯抗體Anti-CD19 Antibody(PB0404)B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒
多食鞘桿菌蛋白磷2C亞型α抗體Anti-CD1D AntibodyB淋巴抗原(CD20)ELISA試劑盒
天牛微桿菌蛋白激C nu型抗體Anti-CD1A AntibodyBH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒
寡單胞菌磷化蛋白激C nu型抗體Anti-CD1C AntibodyBcl-2樣蛋白1(BCL2L1)ELISA試劑盒
熱吸水鏈霉菌磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體Anti-CD1A AntibodyBcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒
釀酒酵母磷甘油脫氫抗體Anti-CD19 AntibodyA組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒
長谷川赤擔(dān)孢酵母磷化泌乳抗體Anti-CD1D AntibodyA組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)ELISA試劑盒
莫哈韋芽孢桿菌半胱天冬-3原抗體Anti-CD2 AntibodyA激PRKA錨定蛋白12(Akap12)ELISA試劑盒
釀酒酵母質(zhì)磷1抗體Anti-CD2 AntibodyAT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)ELISA試劑盒
嗜熱液化芽孢桿菌維生D低磷性佝僂病蛋白Anti-Cd2 AntibodyATP(ATP)ELISA試劑盒
山崗單胞菌多通道膜蛋白PTCHD2抗體Anti-CD22 AntibodyApelin12(AP12)ELISA試劑盒
薄褐孔菌修補(bǔ)相關(guān)蛋白PTCHD3抗體Anti-CD209 AntibodyApelin 36(AP36)ELISA試劑盒
蠟樣芽孢桿菌髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激抗體Anti-CD200 Antibodyapelin 13(AP13)ELISA試劑盒
芽胞桿菌磷化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激抗體Anti-CD22 Antibody(PB0731)apelin 12(AP12)ELISA試劑盒
釀酒酵母磷化血小板源性生長因子受體αAnti-CD209 AntibodyAP-5復(fù)合物β亞基(PP1030)ELISA試劑盒
石狀青霉磷化血小板源性生長因子受體αAnti-CD22 AntibodyAlpha-D 酚/維生E(Alpha-D TPL)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
平菇Pleurotus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:0.98
DNA-PK抑制劑(NU7026)甲基-β-D-葡糖苷
其他甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷;甲基-β-D-葡糖甙
英文名稱:Methyl β-D-glucopyranoside
其他英文名稱:Methyl β-D-glucoside
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:5克/25克
CAS號(hào):709-50-2
C7H14O6=194.18
級(jí)別:BR
含量:≥98%(GC)
熔點(diǎn):109~112℃
比旋光度:-31~-35o(C=5,H2O)
用途:生化研究。
保存:RT