詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
ML-323 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
ML-323是一種有效的可逆的USP1-UAF1抑制劑,在Ub-Rho實(shí)驗(yàn)中,IC50為76nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1572414-83-5 純度:99.61% 分子量:384.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蠕蟲狀節(jié)叢孢嗅覺神經(jīng)相關(guān)蛋白STOML3抗體Anti-GCA Antibody腺苷環(huán)化關(guān)聯(lián)蛋白1(CAP1)ELISA試劑盒
淚珠狀坂口氏酵母絲羧肽1抗體Anti-GC Antibody腺苷環(huán)化9(ADCY9)ELISA試劑盒
黑曲霉神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白18抗體Anti-GCG Antibody腺苷環(huán)化8(ADCY8)ELISA試劑盒
唐菖蒲青霉白介1受體相關(guān)蛋白抗體Anti-GBP1 Antibody腺苷環(huán)化7(ADCY7)ELISA試劑盒
鏈霉菌(青色類群)磷化蛋白酪磷2抗體Anti-GCK Antibody腺苷環(huán)化6(ADCY6)ELISA試劑盒
擬枝孢鐮孢SYF2蛋白抗體Anti-GCLC Antibody腺苷環(huán)化5(ADCY5)ELISA試劑盒
馬爾科夫葉點(diǎn)霉膽固酰基轉(zhuǎn)移2抗體Anti-GDF8/Myostatin/MSTN Antibody腺苷環(huán)化4(ADCY4)ELISA試劑盒
拜氏不動(dòng)桿菌Saitohin蛋白抗體Anti-GDA Antibody腺苷環(huán)化3(ADCY3)ELISA試劑盒
大腸桿菌突觸結(jié)合蛋白1抗體Anti-GDF15 Antibody腺苷環(huán)化2(ADCY2)ELISA試劑盒
米氏假單胞菌磷化突觸結(jié)合蛋白1抗體Anti-GCLC Antibody(PB0197)腺苷環(huán)化10(ADCY10)ELISA試劑盒
根瘤菌突觸結(jié)合蛋白5抗體Anti-GDNF Antibody腺苷環(huán)化1(ADCY1)ELISA試劑盒
癩擬層孔菌磷化D酪激衰減蛋白1抗體Anti-GDNF Antibody腺苷裂解(ADSL)ELISA試劑盒
巨大芽胞桿菌可溶性附著蛋白α-SNAP抗體Anti-GFAP Antibody腺苷甲硫脫羧1(AMD1)ELISA試劑盒
球孢白僵菌信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體Anti-GFAP Antibody(PB0046)腺苷激(ADK)ELISA試劑盒
楷米干酪菌線粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體Anti-GFI1 Antibody腺苷合(ADSS)ELISA試劑盒
腸膜明串珠菌腫瘤抑制蛋白18抗體Anti-GFI1 Antibody腺苷高半胱水解(AHCY)ELISA試劑盒
絲蛋白抑制劑B4抗體鱗狀細(xì)胞抗原靈芝(赤芝,紅靈芝)人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
抑蛋白5抗體乳明串珠菌人支氣管上皮細(xì)胞
泛結(jié)合蛋白P62抗體乳類芽孢桿菌人支氣管成纖維細(xì)胞
芳基磺基轉(zhuǎn)移1抗體赭色擲孢酵母人肺成纖維細(xì)胞
USP1-UAF1抑制劑(ML-323)環(huán)磷酰胺
其他 環(huán)磷酰胺一水物;安道生;環(huán)磷氮芥;癌得星;2-[N,N-雙(2-氯乙基)]-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-氧化物一水合物
英文名稱: cyclophosphamide monohydrate
其他英文名稱: N,N-Bis(beta-chloroethyl)-N',O-propylenephosphoric acid ester amide monohydrate;N,N-bis(2-chloroethyl)tetrahydro-2H-1,3,2-oxazaphosphorin-2-amine 2-oxide monohydrate;Bis(2-chloroethyl)phosphoramide cyclic propanolamide ester monohydrate
產(chǎn)品規(guī)格: BR,97%
包 裝: 1克/5克/25克/100克
CAS號(hào):6055-19-2
C7H15Cl2N2O2P.H2O=279.10
級別:BR
含量:≥97.0% (Titrimetry)
熔點(diǎn):49~53℃
水分:6~7%
性狀:結(jié)晶或結(jié)晶性粉末。溶于水,微溶于乙、、乙二、二烷,幾乎不溶于。熔點(diǎn)41~45℃。閃點(diǎn)>110℃。中等毒,半數(shù)致死量(大鼠,經(jīng)口)94mg/kg。有致癌可能性
用途:生化研究。腫瘤研究中致癌劑。羊毛化學(xué)剪切和昆蟲化學(xué)試驗(yàn)
保存:2~8℃,避光