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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X2059 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來(lái)源 | 肝臟 | 種屬來(lái)源 | 兔 |
詳細(xì)介紹
兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞
培養(yǎng)基：原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：膽管，輸送膽汁的管道。由肝分泌的膽汁，經(jīng)肝左、右管、肝總管、膽囊管進(jìn)入膽囊貯存，肝內(nèi)膽管的部分包括：左、右肝管；左內(nèi)葉、左外葉、右前葉、右后葉膽管；各肝段膽管；小葉間膽管；毛細(xì)膽管。
常見(jiàn)的膽管病變?nèi)缒懙篱]塞、原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等，都是以膽管上皮為病變靶位，因此研究膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特性和病理變化有重要意義。在這些病變過(guò)程中，肝內(nèi)膽管上皮常暴露于常暴露于較高炎癥因子中，會(huì)表現(xiàn)細(xì)胞損傷和繼發(fā)性增值為特征的病理變化。
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 | 商品貨號(hào) | A01X2059 |
組織來(lái)源 | 肝臟 | 種屬來(lái)源 | 兔 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮樣，多角形細(xì)胞 |
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺(tái)中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人源NK細(xì)胞 | 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 |
Human IgE單克隆抗體 | Cy5標(biāo)記的白細(xì)胞介12p40抗體 |
Fluoromount-G熒光封片劑 | Cy5標(biāo)記的低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 |
10×多聚賴氨 | Cy5標(biāo)記的IRG1蛋白抗體 |
明膠水溶液 | Cy5標(biāo)記的跨膜蛋白TMPPE抗體 |
膠原I | Cy5標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白4抗體 |
膠原II | Cy5標(biāo)記的醌氧化還原抗體 |
膠原IV | Cy5標(biāo)記的雌激調(diào)節(jié)基因1抗體 |
細(xì)胞組織運(yùn)輸保存液 | Cy5標(biāo)記的G蛋白偶聯(lián)受體GPR161蛋白抗體 |
小鼠重組 LIF | Cy5標(biāo)記的磷化粘著斑激抗體 |
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子RH TGF-β1 | Cy5標(biāo)記的G蛋白α亞單位蛋白Q抗體 |
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 | 兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 |
兔肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 | Cy5標(biāo)記的調(diào)節(jié)中心體分離早期相關(guān)激BORA抗體 |
Cy5標(biāo)記的形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體 | Cy5標(biāo)記的系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體 |
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子B3 | Cy5標(biāo)記的NFE2相關(guān)因子1抗體 |
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。
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