詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:IDH1-R132H抑制劑(alpha-Mangostin)
英文名稱:alpha-Mangostin 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 Alpha-mangostin是具有廣泛生物活性的膳食呫噸酮,如抗氧化劑,抗過敏,抗病毒,抗菌,抗炎和抗癌作用。它是IDH1突變體(IDH1-R132H)的抑制劑,Ki值為2.85μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):6147-11-1 別名:α-Mangostin 純度:98.59% 分子量:410.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
天鵝頸狀彎曲擔(dān)子酵母Schizosaccharomyces pombe
金色鏈霉菌Saccharomyces cariocanus
吸水鏈霉菌吸水亞種Saccharomyces pasteurianus
AmycolatopsisSaccharomyces paradoxus
丁梭菌Saccharomyces caslii
頭葡萄球菌解脲亞種Saccharomyces barnetti
嗜糖黃桿菌Kazachstania soliola
缺陷短波單胞桿菌Candida albicans
短芽孢桿菌屬Rhodotorula mucilaginosa
桔黃糖多孢菌Hansenula polymorpha
擬莖點(diǎn)霉屬Derxomyces boninensis
蠟狀芽孢桿菌Derxomyces waltii
大腸埃希氏菌Derxomyces schimicola
沖繩微泡菌Saccharomyces cerevisiae
都柏林克羅諾桿菌干奶亞種Sporobolomyces japonicus
易變鏈霉菌Sporidiobolus pararoseus
小鼠基質(zhì)γ羧基谷蛋白(MGP)免疫試劑盒β淀粉樣肽(1-40)抗體人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒 美決明子
小鼠肌激同工MM(CK-MM)免疫試劑盒β淀粉樣肽(1-42)抗體人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒 美商陸
小鼠肌激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒載脂蛋白A1抗體人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒 蒙花苷
小鼠肌激(CK)免疫試劑盒β-抑制蛋白1抗體人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒 迷迭香
IDH1-R132H抑制劑(alpha-Mangostin)BOC-L-天冬
其他N-叔丁氧羰基-L-天冬;BOC-L-天門冬
英文名稱:Boc-Asp-OH
其他英文名稱:N-(tert-Butoxycarbonyl)-L-aspartic acid;Boc-L-aspartic acid
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:5克/25克/100克/500克
CAS號(hào):13726-67-5
C9H15NO6=233.22
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
熔點(diǎn):116~118℃
性狀:結(jié)晶粉末。
用途:生化研究。
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