操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:泛HER激酶不可逆抑制劑(Poziotinib)
英文名稱:Poziotinib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 Poziotinib(NOV120101;HM781-36B)是泛HER激酶不可逆抑制劑,對HER1/HER2/HER4的IC50值分別為3/5/23nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1092364-38-9 別名:HM781-36B;NOV120101 純度:99.66% 分子量:491.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
屎腸球菌沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗原Anti-ECRG4 Antibody人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒
金針菇S相激相關(guān)蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒
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線粒體導(dǎo)肽水解β抗體金黃色葡萄球菌金黃亞種人胃腸道間質(zhì)瘤細胞
富含脯蛋白15抗體日勾維腸桿菌人慢性髓系白血病細胞
香葉烯基轉(zhuǎn)移1β抗體解肝磷脂土地桿菌人永生化肝細胞
泛HER激酶不可逆抑制劑(Poziotinib)對硝基基-α-D-吡喃葡萄糖苷
其他4-硝基基-α-D-吡喃葡萄糖苷;4-硝基基-α-D-呋喃葡糖苷;4-硝基-α-D-吡喃葡糖苷;對硝基-α-D-葡萄糖吡喃苷
英文名稱:PNPG
其他英文名稱:p-Nitrophenyl α-D-glucopyranoside;4-Nitrophenyl α-D-glucopyranoside
產(chǎn)品規(guī)格:生物技術(shù)級,99%
包裝:1克/5克
CAS號:3767-28-0
C12H15NO8=301.25
級別:BioChemika
含量:≥99.0%
比旋光度:-106±5°(C=1 in H2O)
水分:≤10.0%
Free p-Nitrophenol:≤0.01%
性狀:淡黃色粉末,熔點166~167 °C,溶于水:50mg/ml
用途:生化研究。β-D-葡萄糖苷(β-D-Glucosidase)的底物
保存:?20°C,保質(zhì)期2年