操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑
英文名稱(chēng):Olmutinib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg 發(fā)貨周期:1~3天 Olmutinib是表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)酪氨酸激酶抑制劑,在HCC827和H1975細(xì)胞中的IC50值分別為9.2nM和10nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1353550-13-6 別名:HM61713;BI-1482694 純度:99.95% 分子量:486.59 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
根瘤菌屬λ輕鏈抗體Human PDRG1 ELISA Kit透明質(zhì)結(jié)合蛋白2(HABP2)ELISA試劑盒
糞產(chǎn)堿菌糞亞種溶體相關(guān)膜蛋白2抗體Human PDS5A ELISA Kit透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒
異常畢赤酵母肺腺瘤易感蛋白2抗體Human PDE6A ELISA Kit透明質(zhì)蛋白聚糖連結(jié)蛋白1(HAPLN1)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌磷化RNA聚合相關(guān)蛋白LEO1抗體Human PDCD5 ELISA Kit透明質(zhì)(HA)ELISA試劑盒
氣生馬賽菌腫瘤抑制基因LATS2抗體Human PDE6B ELISA Kit銅鋅-過(guò)氧化物岐化(SOD1)ELISA試劑盒
褐橙指孢囊菌磷化白F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human PXDN(Peroxidasin homolog) ELISA Kit銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒
鴨疫里氏桿菌磷化腫瘤抑制基因LATS2抗體Human PDCD6 ELISA Kit同源框A3(HOXA3)ELISA試劑盒
灰色鏈霉菌磷化白F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human PDCD6IP ELISA Kit同型半胱(Hcy)ELISA試劑盒
膠凍樣芽胞桿菌白F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human PDCL ELISA Kit鐵調(diào)25(Hepc25)ELISA試劑盒
沙福芽孢桿菌亮拉鏈轉(zhuǎn)錄因子樣1抗體Human PDCD7 ELISA Kit鐵調(diào)(Hepc)ELISA試劑盒
海小單孢菌層粘連蛋白B2γ1抗體Human PDK3 ELISA Kit鐵-過(guò)氧化物岐化(Fe-SOD)ELISA試劑盒
阿氏芽孢桿菌磷化T活化連接蛋白抗體Human PDLIM3 ELISA Kit鐵蛋白重鏈(FTH)ELISA試劑盒
木荷生德克斯酵母磷化T活化連接蛋白抗體Human PDLIM5 ELISA Kit鐵蛋白(Ferritin)ELISA試劑盒
黃曲霉低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體Human PDLIM7 ELISA Kit鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒
海科貝特氏菌磷脂?;D(zhuǎn)移2抗體Human PDP2 ELISA Kit調(diào)寧蛋白1(CNN1)ELISA試劑盒
孔雀石綠鏈霉菌LRRFIP2蛋白抗體Human PDRG1 ELISA Kit天青殺/肝結(jié)合蛋白(AZU/HBP)ELISA試劑盒
細(xì)黃鏈霉菌Streptomyces│microflavus 質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(E)人參二
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>75.0%(HPLC)(T)原人參三
橄欖色盾殼霉Coniothyrium│olivaceum Bonord. 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T)原人參二
表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑卡那霉硫鹽
其他硫卡那霉;硫單卡那霉;單硫卡那霉;卡那霉;卡那辛
英文名稱(chēng):Kanamycin sulfate
其他英文名稱(chēng):Kanamycin monosulfate;Kanamytrex;Kantrex; Kantrim;Kanamycin A monosulfate
產(chǎn)品規(guī)格:USP級(jí),750mcg/mg
包裝:25克/100克/500克
CAS號(hào):25389-94-0或70560-51-9
C18H38N4O15S=582.58
級(jí)別:USP級(jí)
效價(jià):≥750mcg/mg
PH(1%,H2O)@25℃:6.5~8.5
比旋光度:+112~+123°
硫灰分:≤0.5%
干燥失重:≤8.0%
性狀:粉末,無(wú)臭、極易引濕、水溶液顯右旋光性。在水中極易溶解,在乙、或中幾乎不溶
用途:生化研究。在沒(méi)有影響神經(jīng)元Na+/Ca2+ 反向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(antiporter)的情況下阻斷電壓靈敏的Ca2+ 通道。結(jié)合到核糖體30S 和 50S 亞單位引起蛋白錯(cuò)誤編碼;在蛋白合成起間抑制起始和延長(zhǎng)。譜: 革蘭氏陰性和陽(yáng)性。
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