培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
WNT抑制劑(CCT251545) | CCT251545 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
CCT251545是一種有效的WNT抑制劑,IC50值為5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1661839-45-7 純度:98.48% 分子量:421.92 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
光帽鱗傘絲/蘇蛋白激17A/DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激1抗體Anti-GRB14 Antibody周期D1(CCND1)ELISA試劑盒
里亞氏須腹菌碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗體Anti-GRB2 Antibody周期C(CCNC)ELISA試劑盒
蠟狀芽孢桿菌微管卷曲蛋白SYNC抗體Anti-GRB10 Antibody周期B3(CCNB3)ELISA試劑盒
角微菌磷化SH2結(jié)構(gòu)含磷肌SHIP1抗體Anti-GRB7 Antibody周期B2(CCNB2)ELISA試劑盒
腐皮鐮孢菌磷化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體Anti-GRB7 Antibody周期B(CCNB)ELISA試劑盒
長(zhǎng)枝木霉線粒體促凋亡蛋白抗體Anti-GREM1 Antibody周期A1(CCNA1)ELISA試劑盒
鏈球菌(不定種)墨蝶蛉還原抗體Anti-GREM1 Antibody周期A(CCNA)ELISA試劑盒
北方蜜環(huán)菌核突觸蛋白α+β抗體Anti-GRIA1 Antibody粘附分子1(CADM1)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白2抗體Anti-GRIA1 Antibody(PB0201)因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS3)ELISA試劑盒
糙孢籃狀菌絲消旋Anti-GRIA3 Antibody因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS1)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌鈣結(jié)合樣蛋白/神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤標(biāo)記物抗體Anti-GRIA4 Antibody因子受體樣因子1(CRLF1)ELISA試劑盒
匍枝根霉(黑根霉)絲/蘇蛋白激SRPK7抗體Anti-GRIA3 Antibody維甲結(jié)合蛋白2(CRABP2)ELISA試劑盒
假絲酵母屬磺基葡糖硫抗體Anti-GRIA2 Antibody(PB0202)外信號(hào)調(diào)節(jié)激2(ERK2)ELISA試劑盒
黑柄多孔菌免疫球蛋白μ鏈結(jié)合蛋白2抗體Anti-GRID2 Antibody外信號(hào)調(diào)節(jié)激1(ERK1)ELISA試劑盒
柱枝雙孢霉痙攣性截癱相關(guān)蛋白21抗體Anti-GRIN1 Antibody外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)ELISA試劑盒
產(chǎn)黃青霉G蛋白結(jié)合蛋白3抗體Anti-GRIK1 Antibody外基質(zhì)蛋白1(ECM1)ELISA試劑盒
絲/蘇/酪激STYK1抗體腸沙門氏菌腸亞種人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
絲/蘇蛋白激SRPK1抗體摩氏摩根氏菌人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
導(dǎo)向蛋白3B抗體腸沙門氏菌腸亞種旺茲沃思血清型人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
硫酯1抗體熱生腫塊芽孢桿菌人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
WNT抑制劑(CCT251545)環(huán)孢菌A
其他環(huán)孢霉A;環(huán)孢多肽A;環(huán)孢靈;環(huán)孢;環(huán)胞霉A;S 7481F1;環(huán)孢多肽A;出地明
英文名稱:Cyclosporin A
其他英文名稱:Cyclosporine;Antibiotic S7481F1
產(chǎn)品規(guī)格:USP級(jí),98%
包裝:250毫克/1克/5克
CAS號(hào):59865-13-3
C62H111N11O12 =1202.61
級(jí)別:USP Grade
含量:≥98.0%
性狀:粉末,無(wú)臭無(wú)味。在甲、乙或乙腈中極易溶解,在醋乙酯中易溶,在中溶解,在水中幾乎不溶。比旋度取本品,精密稱定,加甲溶解并制成每1ml中含10mg的溶液,依法測(cè)定,比旋度為-182°至-192°
性狀:含有1分子結(jié)晶水,粉末,略有引濕性,于155℃分解。易溶于甲,微溶于水。1%水溶液的旋光度為+160~+178°
用途:生化研究。具有廣譜作用,對(duì)革蘭氏陽(yáng)性和陰性菌均有良好的活性。
保存:2~8℃