培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
PD153035(ZM252868;AG1517;Tyrphostin AG1517;SU5271)是有效地EGFR抑制劑,Ki和IC50值分別為6和25pM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):183322-45-4 別名:ZM 252868;AG 1517;Tyrphostin AG 1517;SU 5271;PD 153035 純度:98.57% 分子量:396.67 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
少根根霉原變種Saccharomyces cerevisiae
RoseomonasCandida utilis
芽胞桿菌Candida utilis
解脂亞羅酵母Candida utilis
枯草芽孢桿菌Candida utilis
小單孢菌Candida utilis
膠孢Candida utilis
解淀粉芽孢桿菌Candida utilis
危險(xiǎn)羅爾斯通氏菌Candida utilis
瓊氏不動(dòng)桿菌Candida utilis
三骨菇Candida utilis
黃青霉Candida utilis
厭糖鹽土生古菌Candida utilis
高山類(lèi)諾卡氏菌Candida utilis
異常漢遜酵母Candida utilis
加納鏈霉菌Candida utilis
小鼠羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)免疫試劑盒腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體人肺癌標(biāo)志物ELISA試劑盒伐侖克林
小鼠羥脯(Hyp)免疫試劑盒去整合樣金屬蛋白19抗體人肺癌標(biāo)志物ELISA試劑盒桔梗皂苷D
小鼠前心鈉肽(Pro-ANP)免疫試劑盒原癌基因AF4蛋白抗體人胃癌標(biāo)志物ELISA試劑盒桔梗皂苷D2
小鼠前列腺特異性抗原(PSA)免疫試劑盒整合樣金屬蛋白與凝血樣1蛋白抗體人胃癌標(biāo)志物ELISA試劑盒桔梗皂苷元
EGFR抑制劑(PD153035 Hydrochloride)DL-4-羥基-3-甲氧基扁桃
其他 4-羥基-3-甲氧基乙;4-羥基-3-甲氧基扁桃;3-甲氧基-4-羥基扁桃
英文名稱(chēng): VMA
其他英文名稱(chēng): DL-3-Methoxy-4-hydroxymandelic acid;Vanillomandelic acid;Vanilmandelic acid;4-Hydroxy-3-methoxymandelic acid;α,4-Dihydroxy-3-methoxybenzene acetic acid
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
包裝:1克
CAS號(hào):55-10-7
C9H10O5=198.17
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):131~134℃
性狀:鱗片狀結(jié)晶或粉末。灼熱或長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中易樹(shù)脂化。易溶于和水,略溶于乙腈,微溶于。大吸收波長(zhǎng)(0.1mol/L鹽中)230、279nm(ε 6320、2810),(0.1mol/L氫氧化鈉中)247、285、345nm(ε 6860、3960、630)。有刺激性
用途:生化研究。
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