培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
MI-773是一種MDM2-p53相互作用抑制劑,高親和力結(jié)合到MDM2,Ki為0.88nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1303607-07-9 純度:98.0% 分子量:562.5 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鼠傷寒沙門氏菌小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類Anti-NHLH1 Antibody人同型半胱(Hcy)ELISA試劑盒
釀酒酵母小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白Anti-NKTR Antibody人同型半胱(Hcy)ELISA試劑盒
矮棒曲霉人白介27Anti-NID1 Antibody人游離脂肪(FFA)ELISA試劑盒
發(fā)酵畢赤酵母大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體Anti-NKX2-1 Antibody人游離脂肪(FFA)ELISA試劑盒
釀酒酵母人白介28Anti-NIFK Antibody人骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒
棘孢曲霉人白介29Anti-NKX2-6 Antibody人骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒
墨西哥畢赤酵母大鼠凋亡誘導(dǎo)因子Anti-NKX2-4 Antibody人葉(FA)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌人白介23Anti-NKX2-6 Antibody人葉(FA)ELISA試劑盒
暗黑鏈霉菌小鼠CD30分子Anti-NKx2.2 Antibody 人內(nèi)(ET)ELISA試劑盒
雙孢蘑菇小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類Anti-NKX3-1 Antibody人內(nèi)(ET)ELISA試劑盒
光滑青霉人巨噬移動抑制因子Anti-NKX2-8 Antibody人過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒
居巖牙殖球菌大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體Anti-NKX6-3 Antibody人過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒
環(huán)柄菇人組織因子途徑抑制物Anti-NLRX1 Antibody人環(huán)孢A(CsA)ELISA試劑盒
擬青霉小鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體Anti-NKX6-3 Antibody人環(huán)孢A(CsA)ELISA試劑盒
彩色豆馬勃大鼠堿性磷Anti-NLE1 Antibody人神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
釀酒酵母人干擾誘導(dǎo)蛋白10Anti-NMBR Antibody人神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體火木層孔菌人肝癌細(xì)胞(干細(xì)胞庫保藏)
腎結(jié)合蛋白抗體淺黃褐栓菌人間皮瘤細(xì)胞
環(huán)指蛋白211抗體#放射形土壤桿菌人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞Daoy(干細(xì)胞庫保藏)
RET指蛋白樣2/3抗體#需土節(jié)桿菌人小細(xì)胞肺癌
MDM2-p53相互作用抑制劑(MI-773)單寧
其他鞣;丹寧;單寧酯酰水解
英文名稱:Tannase from Aspergillus ficuum
其他英文名稱:Tannin acyl Hydrolase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,200u/g
包裝:1克
CAS號:9025-71-2
級別:BR
活力:≥200 U/g
活力定義:1 U corresponds to the amount of enzyme which changes the absorbance at 310 nm by 1.0 per minute at pH 4.7 and 30°C (tannic acid as substrate, final volume 3 ml)
Total impurities:25 mM potassium phosphate;250 mM NaCl;50% glycerol
性狀:粉末,由曲霉屬等微生物發(fā)酵
用途:生化研究。可水解沒食子單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒食子和葡萄糖
性狀:至淡黃色粉末或夾帶顆粒粉末,存在于多種酵母和其他以及植物中。本品從酵母中提取,可使蔗糖分解成葡萄糖和果糖,從而得到比蔗糖的溶解度更高、不易有結(jié)晶析出的高濃度轉(zhuǎn)化糖漿。
用途:生化研究。能催化蔗糖水解為葡萄糖和果糖的;它還能將密三糖水解為密二糖和果糖
保存:2~8℃,保質(zhì)期1年