培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
IOX1是2OG oxygenase高效廣譜抑制劑,包括JmjC去甲基化酶家族,對(duì)KDM4A和KDM3A的IC50值分別為0.6uM和0.1uM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):5852-78-8 純度:97.04% 分子量:189.17 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
糞腸球菌腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗原Anti-ELOVL1 Antibody人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒
炭黑曲霉腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗原Anti-ELOVL1 Antibody人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒
釀酒酵母腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗原Anti-ELOVL4 Antibody明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒
黑曲霉腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡2配體抗原Anti-ELOVL3 Antibody明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒
三葉草根瘤菌端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗原Anti-ELOVL4 Antibody人非小肺癌抗原(LTA)ELISA試劑盒
深紅酵母TRIM32抗原Anti-ELOVL5 Antibody人非小肺癌抗原(LTA)ELISA試劑盒
褐囊蜜環(huán)菌原肌球蛋白抗原Anti-ELOVL6 Antibody人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌生精凋亡相關(guān)基因4抗原Anti-ELP2 Antibody人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒
硬水黃桿菌CIDEB抗原Anti-ELOVL5 Antibody人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA試劑盒
肉紅鐮孢Tsg101抗原Anti-EMX1 Antibody人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA試劑盒
大腸埃希菌促甲狀腺受體抗原Anti-EMX1 Antibody人本周蛋白(BJP) ELISA試劑盒
黑曲霉自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原Anti-EMB Antibody人本周蛋白(BJP) ELISA試劑盒
密歇根鏈霉菌*肺癌腫瘤阻抑基因1抗原Anti-ENAH Antibody人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA試劑盒
葡萄座腔菌甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗原Anti-EMX2 Antibody人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種微管蛋白-γ抗原Anti-ENO2 Antibody人鱗狀癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA試劑盒
短小芽孢桿菌TWIST蛋白抗原Anti-ENPP3 Antibody人鱗狀癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA試劑盒
轉(zhuǎn)錄因子SOX17抗體平展米曲霉(米曲霉平展變種)人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
分選連接蛋白5抗體裂殖壺菌人胰腺上皮樣癌細(xì)胞
分選連接蛋白2抗體意大利青霉人喉癌上皮細(xì)胞
分選連接蛋白7抗體指狀青霉人惡性黑色瘤瘤株
2OG oxygenase抑制劑(IOX1)對(duì)硝基-N-乙酰-α-D-基葡萄糖苷
其他4-硝基-N-乙酰-α-D-基葡萄糖苷;4-硝基基-2-乙酰胺基-2-脫氧-α-D-吡喃葡糖苷;4-硝基基-2-乙?;?2-脫氧-α-D-吡喃葡萄糖苷
英文名稱:4-Nitrophenyl-N-acetyl-α-D-glucopyranoside
其他英文名稱:p-Nitrophenyl 2-acetamido-2-deoxy-α-D-glucopyranoside;GlcNAc1-a-PNP
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:25毫克
CAS號(hào):10139-02-3
C14H18N2O8=342.30
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
比旋光度:260~272°(C=0.5 in H2O at 20°C)
Free 4-nitrophenol:<0.1%
性狀:粉末
性狀:粉末
用途:生化研究。底物
保存:?20°C