操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:SIRT2抑制劑(Thiomyristoyl)
英文名稱:Thiomyristoyl 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 Thiomyristoyl是高效特異性的SIRT2抑制劑,IC50值為28nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1429749-41-6 純度:98.84% 分子量:581.85 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
金灰青霉Clostridium acetobutylicum
棲土曲霉Bacillus subtilis subsp. subtilis
蠟狀芽孢桿菌Bacillus thuringiensis
狹孢鐮刀菌Bacillus thuringiensis
帚狀云南霉Bacillus thuringiensis
藤黃節(jié)桿菌Bacillus thuringiensis
醋化醋桿菌Bacillus thuringiensis
孔雀石鏈霉菌Bacillus thuringiensis
Bifidobacterium adolescentisBacillus thuringiensis
雪白金針菇Bacillus thuringiensis
尖孢鐮孢*Bacillus thuringiensis
釀酒酵母Bacillus thuringiensis
黃曲霉Bacillus thuringiensis
枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis
大腸埃希氏菌Bacillus thuringiensis
單胞菌Bacillus thuringiensis
磷化蛋白激Cα/β2抗體多汁乳菇德假單胞菌
磷化激M2抗體白蘑菇土壤伊薩酵母
磷化磷酯Cγ2抗體大禿馬勃尖孢鐮孢(斜面)
磷化磷酯Cγ1抗體美味蘑菇蛹蟲草(斜面)
SIRT2抑制劑(Thiomyristoyl)L-脯
其他L-氫化吡咯甲;L-吡咯烷-2-羧;四氫吡咯-2-羧
英文名稱:L-Proline
其他英文名稱:L-2-Pyrrolidinecarboxylic acid;(S)-Pyrrolidine-2-carboxylic acid;H-Pro-OH
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:147-85-3
C5H9NO2=115.13
級別:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:-84.5~-86.8o
PH:5.5~7.0
干燥失重:≤0.30%
灼燒殘渣:≤0.10%
氯化物:≤0.02%
硫鹽:≤0.02%
銨鹽:≤0.002%
重金屬:≤0.001%
砷鹽:≤0.0001%
性狀:結(jié)晶性粉末,無氣味,微有甜味。有吸濕性。與水合茚三反應(yīng)呈黃色,被冰乙化后則顯紅色。易溶于水和乙。熔點(diǎn)220-222℃(分解)
用途:生化和營養(yǎng)研究。制備培養(yǎng)基
保存:RT,避光