詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:LIF抑制劑(EC330)
英文名稱:EC330 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 EC330是白血病抑制因子(LIF)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:2016795-77-8 純度:99.23% 分子量:462.57 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
串泡雙型毛霉短孢變種Bacillus subtilis subsp. subtilis
異常漢遜酵母Bradyrhizobium japonicum
枯草芽孢桿菌Bradyrhizobium japonicum
臭曲霉Bradyrhizobium japonicum
美澳型核果褐腐病菌Bradyrhizobium japonicum
斯賓塞馬丁氏菌Bradyrhizobium japonicum
暗黑橄欖鏈霉菌Rhizobium leguminosarum
薄層菌屬Ensifer meliloti
維也納原小單孢菌Ensifer meliloti
巨大芽孢桿菌 ARhizobium leguminosarum
成團(tuán)泛菌Rhizobium leguminosarum
硬結(jié)節(jié)桿菌Rhizobium leguminosarum
小孢根霉寡孢變種Rhizobium leguminosarum
草菇Rhizobium leguminosarum
球毛殼菌Rhizobium leguminosarum
佐久氏沙雷氏菌Rhizobium leguminosarum
磷化腫瘤抑制基因PTEN抗體長孢馬杜拉放線菌貝萊斯芽孢桿菌
磷化磷脂酰肌激催化亞單位A抗體野野村氏菌噬幾丁質(zhì)菌
磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體橄欖綠鏈霉菌淤泥假單胞菌
磷化蛋白酪磷1C抗體公牛鏈霉菌黑柄炭角菌
LIF抑制劑(EC330)L-乳鎂
其他乳鎂;L-乳鎂氫氧化物
英文名稱:Magnesium L-lactate hydrate
其他英文名稱:L-Lactic acid magnesium salt
產(chǎn)品規(guī)格:BR,97.5%
包裝:100克/500克
CAS號:18917-93-6
C6H10MgO6•xH2O=202.45 (anhydrous basis)
級別:BR
總含量:97.5~101.5%
性狀:結(jié)晶粉末。
用途:生化研究。
色度:≤100APHA
重金屬:≤0.001%
氯化物:≤0.05%
鐵鹽:≤0.001%
硫鹽:≤0.005%
鈣鹽:≤0.002%
砷鹽:≤0.0002%
性狀:無色或微黃色、微粘性澄清液體,無味或輕微特殊氣味
用途:生化研究。
保存:RT