培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
EGFR抑制劑(PD153035) | PD153035 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
PD153035(ZM252868;AG1517;Tyrphostin AG1517;SU5271)是有效地EGFR抑制劑,Ki和IC50值分別為6和25pM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):153436-54-5 別名:ZM 252868;Tyrphostin AG 1517;AG 1517;SU 5271 純度:98.49% 分子量:360.21 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
側(cè)雄腐霉Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒
黃微綠鏈霉菌Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒
伊平屋橋大洋芽孢桿菌Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒
耐久腸球菌Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒
金針菇Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒
土地桿菌Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒
無(wú)環(huán)田頭菇Bacillus thuringiensis大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒
殺結(jié)核鏈霉菌Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒
松口蘑Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒
大孢硬皮馬勃Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒
固囊酵母Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒
短桿菌屬Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑盒
相思根瘤菌Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑盒
空泡單胞菌Lysinibacillus sphaericus大鼠肝生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒
灰樹(shù)花Lysinibacillus sphaericus大鼠肝生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌Lysinibacillus sphaericus大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白TRRAP抗體代爾夫特菌豬肺炎支原體
微管相關(guān)蛋白α6抗體杰氏假單胞菌牛輪狀病毒
T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子TFEB抗體巨大芽胞桿菌早熟艾美爾球蟲(chóng)
轉(zhuǎn)錄延伸因子B2抗體類(lèi)芽胞桿菌禽腺病毒(2型)
EGFR抑制劑(PD153035)N-乙酰-L-
其他N-乙酰-L-α-基氫化肉桂;N-乙?;?L-;N-乙酰-L-基胺;N-乙酰-L-基;L-2-(乙?;?-3-基
英文名稱(chēng):N-Acetyl-L-phenylalanine
其他英文名稱(chēng):L-2-(Acetylamino)-3-phenylpropanoic acid;Ac-Phe-OH
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:5克/25克/100克/500克
CAS號(hào):2018-61-3
C11H13NO3=207.23
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
熔點(diǎn):165~168℃
比旋光度:+40±2°(C=1, MeOH)
性狀:結(jié)晶粉末。
用途:生化研究
保存:RT