操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):DOT1L抑制劑(EPZ004777)
英文名稱(chēng):EPZ004777 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 EPZ004777是一種有效的選擇性DOT1L抑制劑,IC50為0.4nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1338466-77-5 純度:99.89% 分子量:539.67 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
松鼠葡萄球菌磷化抑癌蛋白EZH2抗體Human PPP1R9A ELISA Kit血漿抗凝蛋白S(PS)ELISA試劑盒
Pseudomonas batumici 組蛋白去甲基化JARID1B抗體Human PPP1CC ELISA Kit血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA試劑盒
少孢哈薩克斯坦酵母硫角質(zhì)抗體Human PPP3R2 ELISA Kit血漿激肽釋放(KLKB1)ELISA試劑盒
玫煙色棒束孢角質(zhì)生長(zhǎng)因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human PPP2CA ELISA Kit血漿膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒
Bacillus sp.離子通道蛋白G蛋白4抗體Human PPP2R1B ELISA Kit血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒
海假交替單胞菌通道多聚體結(jié)構(gòu)域KCTD18抗體Human PPP2CB ELISA Kit血紅氧合2(HO-2)ELISA試劑盒
多主葡萄殼菌胞質(zhì)接頭蛋白Keap1Human PPP1CC ELISA Kit血紅氧合1(HO-1)ELISA試劑盒
芽胞桿菌舞蹈癥相關(guān)蛋白KALRN抗體Human PPP1R10 ELISA Kit血紅加氧2(HO-2)ELISA試劑盒
多粘類(lèi)芽孢桿菌內(nèi)流通道蛋白Kir4.1抗體Human PPP2R2A ELISA Kit血紅加氧1(HO-1)ELISA試劑盒
金黃色葡萄球菌金黃亞種樣蛋白3抗體Human PPP2R2B ELISA Kit血紅加氧(HO)ELISA試劑盒
釀酒酵母KLF樣轉(zhuǎn)錄因子7抗體Human PPP1R7 ELISA Kit血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌Kelch樣蛋白8抗體Human PPP3CB ELISA Kit血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA試劑盒
雞新城疫病血凝抑制試驗(yàn)(HI)陽(yáng)性血清離子通道蛋白家族KCNQ2抗體Human PPP1R8 ELISA Kit血紅蛋白α亞基(HB-α)ELISA試劑盒
黑曲霉離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體Human PPP3CC ELISA Kit血紅蛋白H(HbH)ELISA試劑盒
黃桿菌通道蛋白1抗體Human PPP1R9A ELISA Kit血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒
大斑凸臍蠕孢電壓門(mén)控通道蛋白1抗體Human PPP3R2 ELISA Kit血紅蛋白(Hb)ELISA試劑盒
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)去氫木香內(nèi)酯
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)百秋李
巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)β-胡蘿卜
DOT1L抑制劑(EPZ004777)苦
其他 4-硝基-3-甲基對(duì)硝基基-5-吡唑啉;3-甲基-4-硝基-1-(對(duì)硝基)-2-吡唑啉-5-;1-(對(duì)硝基)-3-甲基-4-硝基-5-吡唑啉;4-硝基-3-甲基-1-(對(duì)硝基)-5-吡唑啉;3-甲-4-硝-1-對(duì)硝-5-吡唑啉
英文名稱(chēng): Picrolonic acid
其他英文名稱(chēng): 2,4-Dihydro-5-methyl-4-nitro-2-(4-nitrophenyl)-3H-pyrazol-3-one; 3-Methyl-4-nitro-1-(p-nitrophenyl)-2-pyrazolin-5-one;Picrolic acid
產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%
包裝:25克
CAS號(hào):550-74-3
C10H8N4O5=264.20
級(jí)別:CP
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):114~120℃
干燥失重:≤0.2%
性狀:黃色小葉片狀結(jié)晶。125℃時(shí)分解。其水溶液對(duì)石蕊試紙呈性反應(yīng),能形成不溶性的鈣鹽、銅鹽及鉛鹽等。溶于乙,微溶于水。有刺激性
用途:生化研究。銨、鈣、銅、汞、鉀、鈉、鍶、鋇、鉛、鎂和釷的沉淀劑。生物堿、色、等的沉淀劑
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