操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:KDM4D抑制劑(KDM4D-IN-1)
英文名稱:KDM4D-IN-1 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 KDM4D-IN-1是一種新型組蛋白賴氨酸去甲基化酶4D(KDM4D)抑制劑,IC50為0.41±0.03μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):2098902-68-0 純度:98.0% 分子量:225.21 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
果生假絲酵母Saccharomyces cerevisiae
土地鞘盒菌Candida intermedia var. intermedia
蠟狀芽孢桿菌Pseudozyma rugulosa
普通變形菌Pichia pastoris
拉曼被孢霉Pichia ohmeri
總狀毛霉Rhodosporidium toruloides
鹽帽黃桿菌Sporidiobolus salmonicolor
Candida ethanolica
黑曲霉Bullera oryzae
青霉屬Saccharomyces cerevisiae
木糖氧化纖維菌反硝化亞種Saccharomyces cerevisiae
俄勒岡靈芝Saccharomyces cerevisiae
薄層菌屬Saccharomyces cerevisiae
黃產(chǎn)色鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae
膠孢Candida krusei
暗孢節(jié)菱孢菌Candida krusei
小鼠黑色抗體(MC Ab)免疫試劑盒ATP結(jié)合蛋白家族5抗體人抗肝胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒 木蘭脂
小鼠黑色瘤免疫試劑盒N-甲基嘌呤DNA糖基化人抗肝胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒 木栓
小鼠核轉(zhuǎn)錄因子kBP65(NFkBP65)免疫試劑盒AU5 tag標(biāo)簽抗體人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA試劑盒 木糖
小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)免疫試劑盒鈣離子ATP通道蛋白抗體人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA試劑盒 木通乙苷B
KDM4D抑制劑(KDM4D-IN-1)BOC-L-脯
其他N-叔丁氧羰基-L-脯;(S)-(-)-1-叔丁氧羰基-2-吡咯烷甲;N-Boc-L-脯
英文名稱:BOC-L-Prolinol
其他英文名稱:(S)-1-Boc-2-pyrrolidinemethanol;N-tert-Butoxycarbonyl-L-prolinol
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:5克/25克/100克
CAS號(hào):69610-40-8
C10H19NO3=201.27
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):60~63℃
比旋光度:-46~-52°(C=1.3 ,Chloroform)
性狀:細(xì)粉末晶體
用途:生化研究
保存:RT