操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:RNA polymerase I轉(zhuǎn)錄抑制劑(BMH-21)
英文名稱:BMH-21 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 BMH-21是一新型DNA嵌入劑(DNA intercalator),能結(jié)合rDNA并抑制RNA polymerase I的轉(zhuǎn)錄,不使組蛋白H2AX磷酸化。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):896705-16-1 純度:98.96% 分子量:360.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
總狀毛霉Microbulbifer donghaiensis
黑曲霉Microbulbifer marinus
糙孢藍(lán)狀菌Microbulbifer yueqingensis
Rhizobium miluonense Micrococcus aureus
胡椒枯萎病Micrococcus luteus
易脆毛霉Micrococcus terreus
裂褶菌Micrococcus varians
土地桿菌屬Micrococcus yunnanensis
土地桿菌屬Modestobacter multiseptatus
枯草芽孢桿菌Microvirga guangxiensis
釀酒酵母Modestobacter versicolor
平菇Moraxella osloensis
枯草芽孢桿菌Morganella morganii subsp. morganii
大腸埃希氏菌Mycetocola lacteus
蛹蟲草Mycetocola reblochoni
平菇Mycetocola saprophilus
小鼠血管生成4(ANG-4)免疫試劑盒乙脫氫2抗體人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒檸檬
小鼠血管生成2(ANG-2)免疫試劑盒膜粘連蛋白10抗體人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒枸櫞血根堿
小鼠血管生成1(ANG-1)免疫試劑盒前梯度同源蛋白2抗體人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)ELISA試劑盒構(gòu)樹堿A
小鼠血管生長(ANG)免疫試劑盒乙脫氫5抗體人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)ELISA試劑盒古倫賓
RNA polymerase I轉(zhuǎn)錄抑制劑(BMH-21)DL-異檸檬三鈉鹽
其他DL-異檸檬鈉;DL-異構(gòu)櫞三鈉鹽;1-羥基烷-1,2,3-三鈉鹽
英文名稱:DL-Isocitric acid trisodium salt
其他英文名稱:Isocitric acid trisodium salt;Trisodium 1-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate
產(chǎn)品規(guī)格:BR,93%
包裝:1克/5克
CAS號(hào):1637-73-6
C6H5Na3O7=258.07
級(jí)別:BR
含量:≥93.0%
水分:≤20.0%
Sodium by ICP:25.0~28.3%
硫鹽:≤0.025%
氯化物:≤0.001%
砷:≤0.00005%
水不溶物:≤0.005%
鐵:≤0.001%
重金屬:≤0.001%
性狀:無色透明結(jié)晶或結(jié)晶性粉末。在干燥空氣中風(fēng)化。在100℃失去結(jié)晶水。能溶于水,不溶于。水溶液呈堿性。在空氣中易吸收水份而潮解。比重2.534。熔點(diǎn)880℃
用途:生化研究。軟水劑、除銹劑、金屬電解分析、分散及乳化劑
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