化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X2039 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 頸靜脈 | 種屬來源 | 兔 |
詳細(xì)介紹
組織來源：頸靜脈
種屬來源：兔
細(xì)胞簡介：頸靜脈存在于脊椎動(dòng)物頸部的靜脈。血管內(nèi)皮細(xì)胞層是血液和其它組織的天然屏障。內(nèi)皮細(xì)胞同時(shí)會(huì)合成和分泌凝血和纖維蛋白溶解系統(tǒng)的增強(qiáng)和抑制物，以及影響血小板粘附和聚集的媒介物。它們同時(shí)也會(huì)分泌控制細(xì)胞增殖的蛋白來維持血管壁的健康。內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)分泌t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及響應(yīng)TNF-α，繼而分泌細(xì)胞因子GM-CSF，表達(dá)ICAM-1表面抗體，產(chǎn)生大量的一氧化氮和endothelin。原代靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)系統(tǒng)有助于在特定的體外條件下研究血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能。
培養(yǎng)基：原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形，多角形細(xì)胞
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
兔頸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2039 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
兔頸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈梭形，多角形細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人表皮成纖維細(xì)胞 | MC3T3-E1 Subclone 24 (小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
成纖維細(xì)胞激活蛋白α重組兔單克隆抗體 | 生物標(biāo)記的細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體 |
P388D1 (小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的T細(xì)胞表面糖蛋白CD1C抗體 |
P3X63Ag8 (小鼠骨髓瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的5號(hào)染色體開放閱讀框54抗體 |
P815 (小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的透明質(zhì)合成1抗體 |
PA317 (小鼠成纖維細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體 |
RAW 264.7 (小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的7號(hào)染色體開放閱讀框30抗體 |
RM-1 (小鼠前列腺癌細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的促甲狀腺受體抗體 |
S-180 (小鼠腹水瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的碳酐11抗體 |
SP2/0（小鼠骨髓瘤細(xì)胞） | 生物標(biāo)記的絲氨蛋白45抗體 |
STO (小鼠胚成纖維細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的G蛋白偶聯(lián)受體GPR135蛋白抗體 |
SVEC4-10 (小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 兔頸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生物標(biāo)記的妊娠相關(guān)血漿蛋白A抗體 |
TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的鈣磷蛋白1抗體 |
Y1 [Y-1] (小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) | 生物標(biāo)記的神經(jīng)絲蛋白抗體 |
E.G7-OVA (小鼠T淋巴瘤細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的DNA甲基轉(zhuǎn)移2抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)