培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
BMS777607是一種Met-related抑制劑,能夠抑制c-Met,Axl,Ron和Tyro3的活性,IC50值為3.9nM,1.1nM,1.8nM和4.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1025720-94-8 別名:BMS 817378 純度:98.32% 分子量:512.89 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Sphingomonas koreensis腦特異性磷脂磷樣蛋白1抗體Human PARVG ELISA Kit胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA試劑盒
球孢白僵菌跨膜蛋白TMEM176B抗體Human PARVA ELISA Kit胎盤泌乳(PL)ELISA試劑盒
果生鏈核盤菌富含亮重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白2抗體Human PARVB ELISA Kit胎盤堿性磷(PLAP)ELISA試劑盒
白僵菌富含亮重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白4抗體Human PBK ELISA Kit胎盤核糖核抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒
孟氏假單胞菌LZIC蛋白抗體Human PBX1 ELISA Kit胎盤蛋白14(PP14)ELISA試劑盒
PL110 雜3(灰平)Lgi3蛋白抗體Human PARVA ELISA Kit胎盤蛋白13(PP13)ELISA試劑盒
環(huán)狀芽胞桿菌Lhx4蛋白抗體Human PBX3 ELISA Kit胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒
猴頭信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SCDO3抗體Human PINP(N-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit胎盤催乳(HPL)ELISA試劑盒
慢生根瘤菌RNA聚合相關(guān)蛋白LEO1抗體Human PARVB ELISA Kit胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒
羊毛狀青霉淋巴性脈絡(luò)叢腦膜炎病蛋白抗體Human PARVG ELISA Kit胎兒纖連蛋白(fFN)ELISA試劑盒
粘質(zhì)沙雷氏菌自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3A/3B抗體Human PAWR(PRKC apoptosis WT1 regulator protein) ELISA Kit他克莫司(FK506)ELISA試劑盒
湖泊微桿菌黃體激釋放激/促性腺激釋放激抗體Human PARVB ELISA Kit鎖鏈(DES)ELISA試劑盒
缺陷假單胞菌LRRC23蛋白抗體Human PASK ELISA Kit羧甲基賴(CML)ELISA試劑盒
新月彎孢LRRC39蛋白抗體Human PASK ELISA Kit羧化基質(zhì)谷蛋白(ucMGP)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Human PARVG ELISA Kit羧化不全骨鈣(ucOC)ELISA試劑盒
溶血隱秘桿菌L3MBTL3蛋白抗體Human PAQR4 ELISA Kit髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88(MYD88)ELISA試劑盒
馬氏副球菌Paracoccus│marcusii 質(zhì)量規(guī)格:螯合劑人參皂苷Rg2
木賊鐮孢菌Gibberella│intricans Wollenw. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)人參皂苷Rg1
北極假交替單胞菌Pseudoalteromonas│arctica 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)人參皂苷Rb3
Met-related抑制劑(BMS 777607)聚蔗糖70
其他菲可70;蔗糖與環(huán)氧氯烷的聚合物;蔗糖與氯甲基環(huán)氧乙烷的聚合物
英文名稱:Ficoll70
其他英文名稱:Polysucrose 70;Poly(sucrose-co-epichlorhydrin);Sucrose-epichlorohydrin copolymer;Sucrose polymer with 1-chloro-2,3-epoxypropane
產(chǎn)品規(guī)格:BR,分子量7萬
包裝:10克/25克/100毫升/100克
CAS號(hào):26873-85-8
分子量范圍:6×104~8×104
級(jí)別:BR
比旋光度:+56.5o
性狀:粉末或固體。易溶于水,在中性和堿性溶液中穩(wěn)定,但低于pH3時(shí)水解。應(yīng)避免接觸強(qiáng)氧化劑和還原劑。其溶液的粘度較相同相對(duì)分子質(zhì)量的葡聚糖溶液為低,氯離子常數(shù)小于1
用途:生化研究。分離和提純細(xì)胞等。細(xì)胞研究。腫瘤研究。研究和細(xì)胞移植等
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