詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
英文名稱:Dimethylenastron 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 Dimethylenastron是一種Eg5抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:863774-58-7 分子量:302.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
乳酒假絲酵母Candida reukaufii
產(chǎn)色鏈霉菌Candida reukaufii
累西菲鏈霉菌Candida reukaufii
根瘤菌Candida rugosa
珞珈山科恩氏菌Candida rugosa
球形孢囊菌Candida sake
枯草芽孢桿菌Candida intermedia
核盤菌Candida sake
海南德克斯酵母Candida lambica
綠曲霉Candida krissii
嗜熱乳鏈球菌;嗜熱鏈球菌Candida kruisii
美澳型核果褐腐病菌Candida krusei
甜芝Debaryomyces hansenii var. fabryi
肺炎克雷伯氏菌Candida parapsilosis
焦曲霉Debaryomyces hansenii var. hansen
米根霉Candida tropicalis
小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)免疫試劑盒磷化自噬相關(guān)蛋白9A抗體人促胰液/胰泌(Secretin)ELISA試劑盒靈芝A
小鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫試劑盒磷化自噬相關(guān)蛋白4D抗體人促胰液/胰泌(Secretin)ELISA試劑盒靈芝B
小鼠可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)免疫試劑盒磷化自噬相關(guān)蛋白4D抗體人多肽YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒靈芝D
小鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒磷化腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體人多肽YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒靈芝F
Eg5抑制劑(Dimethylenastron)CBZ-L-脯
其他N-芐氧羰基-L-脯;N-羰芐氧基-L-嘌呤
英文名稱:N-CBZ-L-Proline
其他英文名稱:Z-Pro-OH;N-Benzyloxycarbonyl-L-proline
產(chǎn)品規(guī)格:特純,99%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:1148-11-4
C13H15NO4=249.26
級別:Purum
含量:≥99.0%
熔點(diǎn):75~77℃
比旋光度:-59~-61o(C=2,ACOH)
性狀:細(xì)粉末晶體
用途:用于生化試劑,多肽合成
保存:RT