詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Kif15-IN-1 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
Kif15-IN-1是Kif15驅(qū)動蛋白抑制劑,抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:672926-32-8 純度:99.04% 分子量:430.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大腸埃希氏菌FITC標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SFTPD Antibody核糖體蛋白L6(RPL6)ELISA試劑盒
豌豆根瘤菌FITC標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SFTPB Antibody核糖體蛋白L23A(RPL23A)ELISA試劑盒
光帽鱗傘膠體金標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SFTPA1 Antibody核糖體蛋白L13A(RPL13A)ELISA試劑盒
PX459 V2.0FITC標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SFTPA1/2 Antibody(PB0433)核糖激(RBKS)ELISA試劑盒
異常畢赤酵母辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SGCA Antibody核糖核抑制因子(RI)ELISA試劑盒
玫瑰黃鞘單胞菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SGK1 Antibody核糖核外切3(ERI3)ELISA試劑盒
運(yùn)動節(jié)桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SGK1 Antibody核糖核外切2(ERI2)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌PE標(biāo)記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-SGK1 Antibody核糖核外切1(ERI1)ELISA試劑盒
野土地桿菌辣根過氧化物標(biāo)記兔抗人IgAAnti-SHANK3 Antibody核糖核T2(RNASET2)ELISA試劑盒
魯酵母生物標(biāo)記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-SHBG Antibody核糖核P(RNASEP)ELISA試劑盒
棒桿菌屬生物標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SHC1 Antibody核糖核L(RNASEL)ELISA試劑盒
Bacillus aryabhattai生物標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SHFM1 Antibody核糖核K(RNASEK)ELISA試劑盒
釀酒酵母生物標(biāo)記的兔抗人分泌型IgAAnti-SHH Antibody核糖核H(RNASEH)ELISA試劑盒
埃及枝頂孢生物標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SHC1 Antibody(PB0435)核糖核A9(RNASE9)ELISA試劑盒
香草蘭根疾Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SHMT1 Antibody核糖核A8(RNASE8)ELISA試劑盒
黃桿菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SHISA7 Antibody核糖核A7(RNASE7)ELISA試劑盒
核纖層蛋白A識別因子抗體Bacillussubterraneus大鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物
中性鞘磷脂2抗體Helcococcuskunzii大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞提取物
核受體蛋白NR2E1抗體脫葉鏈霉菌大鼠心肌細(xì)胞提取物
N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體梭菌屬大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
Kif15驅(qū)動蛋白抑制劑(Kif15-IN-1)甘油醛-3-磷脫氫
其他3- 磷甘油醛脫氫
英文名稱:GAPDH
其他英文名稱:Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase from rabbit muscle;D-Glyceraldehyde 3-phosphate:NAD+ oxidoreductase (phosphorylating)
產(chǎn)品規(guī)格:BR,75u/mg
包裝:500U/1KU/5KU
CAS號:9001-50-7
級別:BR
活力:≥75units/mg protein
活力定義:One unit will reduce 1.0 μmole of 3-phosphoglycerate to D-glyceraldehyde 3-phosphate per min in a coupled system with 3-phosphoglyceric phosphokinase at pH 7.6 at 25 ℃
Protein:≥85% biuret
3-Phosphoglyceric phosphokinase:≤0.05%
用途:生化研究。
保存:-20℃